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![花椰菜抗病相關(guān)基因OXO與CHS的克隆及功能分析.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/166c4aa1-d034-4cea-8fb5-4089547a263d/166c4aa1-d034-4cea-8fb5-4089547a263d1.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、十字花科蔬菜菌核病,是由核盤菌(Sclertinia sclerotiorum)引起的一種病害,每年造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,查爾酮合成酶(Synthetase chalconeCHS)是苯丙氨酸代謝途徑的關(guān)鍵酶,合成的查爾酮為類黃酮提供基本碳骨架,在植物的抗病性中起到重要作用。草酸氧化酶(oxalate oxidaseOXO)在生物界降解草酸的過(guò)程中起到十分重要的作用,它通過(guò)降解草酸,產(chǎn)生H2O2和CO2,在植物的抗病防御中發(fā)揮重要功能。<
2、br> 本研究以花椰菜和擬南芥為材料,采用同源克隆的方法從花椰菜中克隆了CHS和OXO基因,對(duì)OXO基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析,并將他們轉(zhuǎn)入擬南芥與花椰菜,探究CHS和OXO基因在植物抗病性與生長(zhǎng)發(fā)育中的作用。
1.成功的克隆了花椰菜OXO和CHS基因DNA與cDNA全長(zhǎng),序列分析顯示,花椰菜OXO基因編碼206個(gè)氨基酸,屬于cupin家族。BoOXO氨基酸序列與油菜、擬南芥germin-like蛋白同源性達(dá)97%與88%,Bo
3、OXO蛋白為疏水性蛋白,無(wú)跨膜區(qū)。
2.成功構(gòu)建植物表達(dá)載體pC3301-BoOXO與pC3301-BoCHS,并用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法成功轉(zhuǎn)入擬南芥與花椰菜,經(jīng)過(guò)Basta抗性篩選,分子鑒定,獲得BoOXO轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性擬南芥2株,花椰菜16株;得到BoCHS轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性擬南芥3株,花椰菜7株。
3. T3代擬南芥的表型分析顯示,異位表達(dá)BoOXO基因,可促進(jìn)擬南芥?zhèn)雀纳L(zhǎng),葉片、花與果莢的增大,提高結(jié)實(shí)率;異位表達(dá)BoCHS
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