1、目的:
　　(1)建立大鼠變應(yīng)性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)模型;
　　(2)觀察TLR2在大鼠鼻粘膜組織和人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中的表達;
　　(3)觀察TLR2激動劑肽聚糖(Peptidoglycan,PTG)和NF-κB抑制劑(Pyrroli dinedi thiocarbami cacid,PDTC)對IFN-β、IgE、IκB、IRAK-1、MyD88、IL-1、IL-6、NF-κB

2、、TLR2、TNF-β、TRAF-6表達的影響;
　　(4)探討TLR2在TLR2-NF-κB信號通路中的作用;
　　(5)探討雷公藤內(nèi)酯醇(Triptolide,TP)對AR的作用及對TLR2-NF-κB信號通路的干預(yù)作用。
　　方法:
　　(1)采用卵清白蛋白腹腔注射并滴鼻建立大鼠變應(yīng)性鼻炎模型;
　　(2)體外培養(yǎng)人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC,采用PTG激活TLR2,PDTC抑制NF-κB活性;

3、>　　(3)分別采用免疫組化和免疫細胞化學(xué)觀察大鼠鼻粘膜組織和人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中細胞因子IFN-β、IgE、IκB、IRAK-1、MyD88、IL-1、IL-6、NF-κB、TLR2、TNF-β、TRAF-6的表達;
　　(4)采用Real-TimePCR檢測這些細胞因子的mRNA水平;
　　(5)采用WesternBlot檢測這些細胞因子的蛋白表達水平;
　　(6)致敏前腹腔注射30mg/kg·dTP,觀

4、察TP對大鼠AR癥狀及TLR2-NF-κB信號通路的影響。
　　結(jié)果:
　　(1)采用卵清白蛋白腹腔注射并滴鼻成功建立了大鼠變應(yīng)性鼻炎模型;
　　(2)AR大鼠鼻粘膜組織中TLR2和NF-κB都明顯增高;TLR2激動劑PTG可增強TLR2和NF-κB的表達,而NF-κB抑制劑PDTC可抑制NF-κB的表達,但不能抑制TLR2的表達;
　　(3)模型組、PTG組和PDTC組大鼠鼻粘膜組織中所有上述細胞因子的表達量都

5、高于對照組;除IFN-β以外,PTG組幾乎所有上述細胞因子的表達量都高于模型組和PDTC組;PDTC組MyD88、IRAK-1、TRAF-6、TLR2的表達量與模型組幾乎處于同一水平,二者無明顯差異;PDTC組IgE、IκB、IL-1、NF-κB的表達量幾乎都明顯低于模型組;PDTC對IL-6和TNF-β的表達無明顯的抑制作用;
　　(4)模型組、PTG組和PDTC組大鼠鼻粘膜組織中IFN-β的表達水平都稍高于對照組,但模型組、P

6、TG組和PDTC組大鼠鼻粘膜組織中IFN-β的表達水平無明顯差異;
　　(5)模型組、PTG組和PDTC組人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中所有上述細胞因子的表達量都高于對照組;除IFN-β以外,PTG組幾乎所有上述細胞因子的表達量都高于模型組和PDTC組;PDTC組MyD88、IRAK-1、TRAF-6、TLR2的表達量與模型組幾乎處于同一水平,二者無明顯差異;PDTC組IgE、IκB、IL-1、NF-κB的表達量幾乎都明顯低于模型

7、組;PDTC對IL-6和TNF-β的表達無明顯的抑制作用;
　　(6)模型組、PTG組和PDTC組人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中IFN-β的表達水平都稍高于對照組,但模型組、PTG組和PDTC組人鼻粘膜上皮細胞株HNEpC中IFN-β的表達水平無明顯差異;
　　(7)TP組大鼠AR癥狀得到較有效地改善,上述細胞因子的表達量都明顯低于模型組。
　　結(jié)論:
　　(1)采用卵清白蛋白腹腔注射并多次滴鼻可成功建立大鼠變應(yīng)

8、性鼻炎模型;
　　(2)TLR2和NF-κB在AR發(fā)病過程中起著關(guān)鍵作用;
　　(3)推測AR的發(fā)病機制為:鼻粘膜細胞接觸過敏原后,TLR2被激活,先與MyD88結(jié)合,激活I(lǐng)RAK-1,IRAK-1活化后進而激活NF-κB和IκB,啟動IL-1、IL-6、TNF-β、IgE的表達,從而誘發(fā)變應(yīng)性鼻炎;
　　(4)TLR2介導(dǎo)的TLR2-NF-κB信號通路是一種MyD88依賴性通路;
　　(5)人和大鼠AR的發(fā)病過