1、注意缺陷多動(dòng)障礙(Attention Deficit Hyperactivity Disorder,ADHD)是兒童常見(jiàn)的神經(jīng)行為問(wèn)題，發(fā)病率達(dá)2.59％～7.25％，嚴(yán)重影響兒童的身心健康和學(xué)習(xí)生活，因此，有關(guān)ADHD的研究一直是兒科學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。然而，由于ADHD涉及腦的多個(gè)解剖部位及神經(jīng)遞質(zhì)傳遞系統(tǒng)異常，以及以人體為研究對(duì)象存在局限性，其相關(guān)研究仍是21世紀(jì)醫(yī)學(xué)難點(diǎn)之一。 Homer 1、Homer 2是本課題組先前通

2、過(guò)基因芯片篩選出的差異表達(dá)于目前廣泛應(yīng)用的 ADHD動(dòng)物模型SHR/WKY大鼠(Spontaneously Hypertensive Rat，SHR/Wistar Kyoto，WKY)前額葉的基因。Homer 1、Homer 2同屬Homer家族成員，各自存在多種不同剪切形式，其編碼的蛋白是新發(fā)現(xiàn)的一類位于突觸后膜的重要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白，主要通過(guò)和代謝型谷氨酸受體(group I metabotropic glutamate recep

3、tor，mGluR I)、三磷酸肌醇受體(inositol trisphosphate，IP3R)、Shank等蛋白結(jié)合，在突觸后致密斑的重塑、受體細(xì)胞定位、突觸前后信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、突觸形成中起重要作用。因此，提示該基因可能參與到ADHD的病因及發(fā)病機(jī)制中，然而國(guó)內(nèi)外均未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。 本課題分兩部分，通過(guò)觀察Homer不同亞型在SHR/WKY大鼠不同腦區(qū)的表達(dá)差異情況，以及探討臨床常用藥物-鹽酸哌甲酯(methylphenidate，

4、MPH)對(duì)SHR大鼠行為、Homer及其相關(guān)基因mGluR I、IP3R、Shank表達(dá)的影響，來(lái)闡明Homer與ADHD之間的密切關(guān)系。 本研究是針對(duì)注意缺陷多動(dòng)障礙發(fā)病機(jī)制的探索性研究，有利于了解兒童ADHD的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制，研究結(jié)果將為ADHD發(fā)病機(jī)制及治療機(jī)理提供新的線索和理論依據(jù)。 1.Homers不同亞型在SHR/WKY大鼠不同腦區(qū)差異表達(dá)的研究目的分析Homers同亞型在ADHD動(dòng)物模型幼年SHR大鼠，及其

5、對(duì)照組WKY大鼠不同腦區(qū)差異表達(dá)情況。 方法：(1)開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)觀察幼年SHR/WKY大鼠自發(fā)活動(dòng)情況；(2)應(yīng)用RT-PCR、Westem Blotting技術(shù)檢測(cè)SHR/WKY大鼠前額葉、海馬、伏核、紋狀體等腦區(qū)中Homer 1a、Homer 1b/c、Homer 2a/b mRNA和蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)顯示，SHR大鼠水平活動(dòng)、直立次數(shù)均較對(duì)照WKY大鼠顯著增高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=8.34，p<0

6、.05；t=4.43，p<0.05)；(2)RT-PCR結(jié)果顯示，SHR大鼠前額葉中Homer 1a、Homer 2a/b mRNA表達(dá)豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.56，p<0.05；t=5.85，p<0.05)，而Homer 1b/c無(wú)著性差異。SHR大鼠海馬中Homer 1a、Homer 2a/b mRNA表達(dá)豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.95，p<0.05；t=2.66，p<0.0

7、5)，而Homer 1b/c無(wú)顯著性差異。SHR大鼠伏核中Homer 2a/b mRNA表達(dá)豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.66，p<0.05)，而Homerla、Homer 1b/c無(wú)著性差異。SHR大鼠紋狀體中Homer 1a、Homer 1b/c、Homer 2a/b mRNA表達(dá)豐度與、WKY大鼠均無(wú)顯著性差異；(3)WestemBlotting結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SHR大鼠前額葉eeHomer 1a、Homer 2

8、a/b蛋白表達(dá)豐度較WKYA鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.76，p<0.05：t=3.40，p<0.05)；SHR大鼠海馬中Homer 1a、Homer 2a/b蛋白表達(dá)豐度較WKY大鼠顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.31，p<1.05：t=3.27，p<0.05)。 結(jié)論：(1)本實(shí)驗(yàn)所用幼年SHR大鼠自發(fā)活動(dòng)水平顯著高于對(duì)照WKY大鼠，符合作為ADHD動(dòng)物模型的要求；(2)SHR大鼠前額葉、海馬腦gHomer