中藥藍(lán)玉簪龍膽燈臺抗病毒實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  1.研究藍(lán)玉簪龍膽,燈臺兩種中藥對呼吸道合胞病毒株(RSV-LONG株)感染人喉癌(Hep-2)細(xì)胞引起的細(xì)胞病變(CPE)的作用,分析其可能的抗RSV機制。
  2.研究藍(lán)玉簪龍膽,燈臺兩種中藥對RSV引起的小鼠肺部感染的治療效果,分析其可能的抗炎、抗病毒作用。
  方法:
  1.體外細(xì)胞實驗:以Hep-2為宿主細(xì)胞,通過光鏡下觀察CPE法和四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法,測定藍(lán)玉簪龍膽,燈臺對H

2、ep-2細(xì)胞的毒性作用;檢測二種中藥不同濃度下對RSV直接殺傷作用、病變抑制作用以及阻斷作用,確認(rèn)藥物的有效作用方式,同時設(shè)空白對照組及病毒對照組。
  2.體內(nèi)動物實驗:通過對昆明種小鼠清醒狀態(tài)下滴鼻感染,建立RSV感染小鼠模型;分別給與藍(lán)玉簪龍膽水煎液、燈臺水煎液灌胃治療,每天一次,療程7天。于最后一次給藥12小時后處死小鼠,取出肺組織進(jìn)行切片HE染色和RSV直接免疫熒光染色,觀察建模成功的小鼠病毒性肺炎進(jìn)展程度以及它們對病毒

3、性肺炎的治療情況。同時設(shè)空白對照組及病毒對照組。
  結(jié)果:
  1.藍(lán)玉簪龍膽細(xì)胞實驗,各類藥物無毒濃度界值分別為:藍(lán)玉簪龍膽水煎液(6.25mg/ml)、正丁醇提取液(1700mg/ml)、乙酸乙酯提取液(19.1mg/ml)、氯仿提取液(7.5mg/ml),燈臺水煎液(12.5mg/ml)。細(xì)胞實驗顯示:與病毒對照組相比,藍(lán)玉簪龍膽水煎液、藍(lán)玉簪正丁醇、乙酸乙酯、氯仿提取液在各自無毒濃度稀釋32倍以內(nèi)均具有抑制RSV病

4、變效果,且呈劑量依賴關(guān)系。藍(lán)玉簪各提取液不同稀釋倍數(shù)在直接殺傷及阻斷入侵兩方面效果不明確。
  2.藍(lán)玉簪龍膽動物實驗:小鼠肺組織病理切片HE染色顯示:空白對照組小鼠絕大部分肺泡無炎性積液浸潤,肺泡間隔不寬、無充血、水腫,無炎性細(xì)胞浸潤。病毒對照組可見明顯的間質(zhì)性肺炎病變,表現(xiàn)為支氣管、細(xì)支氣管壁、肺泡壁及肺間質(zhì)充血、水腫,并伴有大量淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤;肺泡內(nèi)大量炎性漿液滲出,藍(lán)玉簪水煎液治療組肺泡內(nèi)炎性漿液滲出及炎性細(xì)胞浸潤

5、明顯改善。肺間質(zhì)充血、水腫明顯減輕,其內(nèi)淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞浸潤明顯較少。直接免疫熒光染色顯示:對照組可見肺組織肺泡上皮內(nèi)存在明亮的熒光顆粒,空白組可見可疑的非特異染色熒光存在,藍(lán)玉簪水煎液組可見RSV顆粒數(shù)量及亮度均明顯下降,呈微弱的可疑熒光。
  3.燈臺細(xì)胞實驗:燈臺水煎液在無毒濃度稀釋32倍以下在病變抑制、直接殺傷、阻斷入侵三種方式上均具有一定抗RSV作用。
  4.燈臺動物實驗:小鼠肺組織病理切片HE染色顯示:空白對

6、照組小鼠肺泡內(nèi)無炎性漿液浸潤,肺泡間隔不寬,無充血、水腫,其內(nèi)未見炎性細(xì)胞浸潤。病毒對照組可觀察到大量肺泡內(nèi)炎性漿液滲出,肺泡間隔明顯增寬、水腫、其內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤。燈臺治療組可見炎性漿液滲出已大大減輕,肺泡間隔不寬,其內(nèi)未見明顯炎性細(xì)胞浸潤。直接免疫熒光顯示,空白對照組無特異性熒光顆粒,病毒對照組內(nèi)可見大量熒光顆粒分布在肺泡上皮。燈臺治療組相比對照組,熒光的亮度及顆粒數(shù)量均大大降低,呈可疑熒光。證實了燈臺可以抑制RSV在小鼠肺組織內(nèi)

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