1、中草藥不僅具有很好的防病治病作用，而且也為開發(fā)研究新的藥用成分提供了廣闊的資源，因此受到科學(xué)界的廣泛關(guān)注。為了指導(dǎo)臨床上安全有效的使用中草藥，必須建立快速、靈敏、準(zhǔn)確的分析方法，以便強化和規(guī)范中草藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，深化它們在藥理學(xué)、毒理學(xué)及藥物代謝動力學(xué)等方面的研究。因為中草藥不像化學(xué)藥品那樣單純和規(guī)范，它們不僅成分復(fù)雜，并且成分之間相互影響和作用，同一成分化合物的分析結(jié)果可能會因母體藥材或制劑配方的改變而受到不同程度的影響。所以根據(jù)分析的

2、樣品、目的和要求，對中草藥同一成分化合物建立不同的分析方法和定量標(biāo)準(zhǔn)也是十分必要的?，F(xiàn)代高效液相色譜(HPLC)技術(shù)具有高效、準(zhǔn)確、靈敏度高、操作方便等優(yōu)點，非常適合活性成分復(fù)雜、含量低的中草藥研究。本論文是在前人的工作基礎(chǔ)上，主要開展了以下幾方面的創(chuàng)新性研究工作： (1)建立了測定銀黃制劑和大鼠血漿中綠原酸及黃芩甙的HPLC新方法。 (2)首次采用HPLC開展了銀黃制劑在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究，計算并分析了藥代動力學(xué)

3、參數(shù)。 (3)首次研究探討了不同給藥方式和劑量對大鼠服用銀黃制劑后血液中綠原酸及黃芩甙“藥-時曲線”的影響。 (4)首次建立了同時測定綠原酸、咖啡酸、阿魏酸、原兒茶酸和原兒茶醛的HPLC法，并用于獸用制劑“復(fù)方蒲公英合劑”及其原料藥材中相關(guān)成分的分析研究。 (5)首次研究探討了制劑工藝對“復(fù)方蒲公英合劑”有效成分含量的影響。 (6)在國內(nèi)首次開展了中草藥有效成分松蘿酸的透皮實驗研究。 本論文共分為

4、六章。第一章：從HPLC的發(fā)展、聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用、定量分析方法以及在中草藥研究中的應(yīng)用幾個方面詳細(xì)介紹了HPLC分析技術(shù)的研究進(jìn)展與應(yīng)用現(xiàn)狀。 第二章：建立了測定大鼠血漿中綠原酸的RP-HPLC-UV法(反相高效液相色譜—紫外測定法)。在0.4-40μg/ml的濃度范圍內(nèi)，血漿中的綠原酸濃度與相應(yīng)的峰面積比值(綠原酸/內(nèi)標(biāo))之間有好的線性關(guān)系，綠原酸的回收率在85.29-89.12％的范圍內(nèi)，定量限(LOQ)為0.4μg/ml，分

5、析方法有高的準(zhǔn)確度(-2.20≤RE≤5.00％，RE表示分析的相對誤差)和精密度(RSD≤10.78％，RSD表示分析的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差)。該方法被成功地用于大鼠服用銀黃顆粒后血中綠原酸的藥代動力學(xué)研究，在此基礎(chǔ)上分析探討了不同給藥劑量及方式對血中綠原酸“藥-時曲線”的影響。 第三章：建立了測定大鼠血漿中黃芩甙的RP-HPLC-UV法。在0.3-30μg/ml的濃度范圍內(nèi)，血漿中的黃芩甙濃度與相應(yīng)的峰面積比值(黃芩甙/內(nèi)標(biāo))之間有

6、好的線性關(guān)系，黃芩甙的回收率在96.31-107.22％之間，定量限為0.3μg/ml，分析方法有高的準(zhǔn)確度(-3.00≤RE≤6.67％)和精密度(RSD≤8.08％)。該方法被成功地用于大鼠服用銀黃顆粒和銀黃口服液后血中黃芩甙的藥代動力學(xué)研究，計算并獲得有意義的藥代動力學(xué)參數(shù)，在此基礎(chǔ)上分析探討了不同給藥方式對血中黃芩甙動態(tài)變化的影響。 第四章：建立了同時測定綠原酸、咖啡酸、阿魏酸、原兒茶酸和原兒茶醛的RP-HPLC-UV法

7、。在2-200μg/ml的濃度范圍內(nèi)，以上5種化合物的濃度與相應(yīng)的峰面積之間有好的線性關(guān)系，它們的回收率均在96.72-104.07％之間，檢測限(LOD)在0.05-0.78μg/ml范圍內(nèi)，分析變異系數(shù)(CV)在0.894.50％范圍內(nèi)。該新方法可作為獸用“復(fù)方蒲公英合劑”(FFPM)的定量分析方法，也可用于FFPM制劑工藝的研究以及蒲公英、金銀花和當(dāng)歸中相關(guān)成分的分析測定。 第五章：通過對分析方法的認(rèn)證比較，選擇并建立了分

8、別測定綠原酸和黃芩甙的RP-HPLC-UV新方法。在1-50μg/ml濃度范圍內(nèi)，綠原酸和黃芩甙的濃度與它們相應(yīng)的峰面積之間均有好的線性關(guān)系，黃芩甙的定量限為0.3μg/ml，綠原酸的定量限為0.2μg/ml，它們的回收率均在97-104％之間，分析方法有高的精密度和準(zhǔn)確度：RSD＜5％，-3％＜RE＜4％。新方法簡單、準(zhǔn)確、靈敏，可作為銀黃顆粒的定量分析方法。 第六章：采用體外透皮試驗裝置、紫外分光光度分析法和離體兔皮，初步對