1、高效液相色譜法(HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法和氣相色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型分離分析技術(shù)。鑒于其簡便、快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點(diǎn)，至今，已在生物工程、制藥工業(yè)、食品工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測、石油化工等領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。 本文建立了用反相高效液相色譜法研究中藥連翹、柿葉和峨嵋野連中有效成分的含量測定新方法，并建立了高良姜和石韋藥材的高效液相指紋圖譜。論文由綜述和研究報告

2、兩部分組成，綜述部分簡單概述了高效液相色譜的特點(diǎn)、色譜技術(shù)方面的進(jìn)展、在中草藥有效成分分析中的應(yīng)用以及中藥指紋圖譜質(zhì)控技術(shù)。研究報告部分建立了中藥連翹、柿葉和峨嵋野生黃連中幾種有效成分的含量測定及高良姜和石韋藥材的高效液相色譜指紋圖譜的建立，包括：反相高效液相色譜法同時測定連翹和柿葉中的3種黃酮和2種三萜酸、反相高效液相色譜法同時測定峨嵋野生黃連中不同部位的3種生物堿以及高良姜和石韋藥材的高效液相指紋圖譜研究。 1．高效液相色譜

3、法同時測定柿葉和連翹中黃酮和三萜類化合物的含量建立了一種同時測定黃酮類和三萜類化合物的反相高效液相色譜法。采用EclipseXDB—C18(150mm×4.6mm，5μm)色譜柱，以甲酵—乙腈-0.05％磷酸(三乙胺調(diào)pH3.0)為流動相，采用梯度洗脫，柱溫為30℃，0～10min流速為1.0mL/min，10～12min流速線性變化至0.5mL/min，12min后流速恒定為0.5mL/min，檢測波長采用波長程序。蘆丁、金絲桃苷、槲

4、皮素、齊墩果酸和熊果酸的線性范圍分別為1.632～489.6、1.045～522.5、1.349～134.9、5.290～529.0、5.075～507.5mg/L，相關(guān)系數(shù)均大于0.999。檢測限分別為0.096、0.196、0.043、0.639、0.733mg/L。該方法靈敏快速，結(jié)果可靠，重現(xiàn)性好，可用于柿葉和連翹中黃酮和三萜類化合物的分離測定。 2．峨嵋野生黃連不同部位三種生物堿的含量測定建立一反相高效液相色譜法同時測

5、定峨嵋野生黃連不同部位鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量。采用ZORBAXEclipseXDB—C8柱(150×4.6mm；5μm)，以乙腈-0.025mol/L，磷酸二氫鉀水溶液(磷酸調(diào)pH3.0)(25：75)為流動相，流速為1.0mL/min，柱溫為30℃，檢測波長為342nm，外標(biāo)法定量。鹽酸藥根堿、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的線性范圍分別為0.0256～160、0.0147～92.0、0.0371～116μg/mL。相關(guān)系數(shù)

6、均為0.9999。檢測限分別為0.010、0.009、0.005μg/mL。該方法靈敏快速，線性范圍寬，重現(xiàn)性好，用于峨嵋野生黃連中三種生物堿的含量測定結(jié)果可靠。 3．高良姜藥材高效液相指紋圖譜研究建立了高良姜HPLC指紋圖譜分析方法。采用EclipseXDB—C18(150mm×4.6mm，5μm)色譜柱，流動相為甲醇—乙腈—水(冰乙酸調(diào)pH3.0)，梯度洗脫，流速：1.0mL/min，柱溫：30℃，檢測波長254nm。確定了

7、12個不同產(chǎn)地高良姜藥材乙醇提取部分13個共有峰，各產(chǎn)地藥材指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度均大于0.9，可以用來作定性研究。該方法準(zhǔn)確，重復(fù)性好，為科學(xué)評價及有效控制其質(zhì)量提供參考。 4．石韋藥材高效液相指紋圖譜研究用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化石韋的超聲提取條件，并建立了石韋高效液相指紋圖譜分析方法。采用EclipseXDB—C18(150mm×4.6mm，5μm)，色譜柱，流動相為乙腈—水(冰乙酸調(diào)pH3.0)，梯度洗脫，流速：0.8mL/m