1、目的：表皮生長因子受體(EGFR，ErbB)酪氨酸激酶家族在多種腫瘤中有表達或高表達，在特異性配體的誘導下能夠發(fā)生家族成員的二聚化，從而激活細胞內(nèi)下游信號轉(zhuǎn)導途徑，調(diào)空細胞的增殖、分化、遷移等生物效應。異常的ErbB受體信號與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關系。由于ErbB受體信號網(wǎng)絡在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用，以ErbB受體為靶點的抗腫瘤藥物成為了近年來腫瘤治療研究中熱點領域。本研究旨在通過對幾類藥物聯(lián)合機制的研究，尋找其最

2、佳聯(lián)合的方案，指導臨床合理用藥。 方法： 1．采用MTT法檢測不同藥物對腫瘤細胞系的IC50值，并根據(jù)IC50值得出C225與化療藥物同時和序貫用藥方案的CI值(聯(lián)合指數(shù))。 2．Western blot分別檢測C225與化療藥物同時和序貫用藥方案后，靶標分子的表達水平變化，包括：AKT、P-AKT、MAPK、P-MAPK。3．流式細胞儀：檢測細胞經(jīng)C225與化療藥物同時和序貫用藥方案后，細胞周期分布的變化及凋亡

3、比例。 結(jié)果： 1、EGFR單克隆抗體C225與化療藥物聯(lián)合對細胞的殺傷作用強于單用化療藥物。 2、與三藥同時應用相比，先化療藥物后C225的序貫方案CI指數(shù)更低，也就是具有更強的協(xié)同作用。 3、化療藥物與C225聯(lián)合能顯著增強其對Akt、 MAPK磷酸化的抑制，并且先化療藥物后C225的序貫方案抑制效果最為顯著。 4、先化療藥物后C225的序貫方案可誘導更多的腫瘤細胞發(fā)生凋亡以及產(chǎn)生G1/M期阻

4、滯。 結(jié)論： 1．C225與化療藥序貫聯(lián)合后在抑制Akt、 MAPK蛋白磷酸化，影響信號通路傳導，誘發(fā)腫瘤細胞G1/M期阻滯及凋亡均優(yōu)于C225與化療藥同時給藥組，二者序貫聯(lián)合的CI值為協(xié)同相加性； 2．驗證了C225作為EGFR靶向抑制劑是一種有效的抗腫瘤化合物，顯示C225與化療序貫聯(lián)合可以獲得比二者同時給藥更好的治療效果。 3．證明了EGFR-TK靶向藥物與化療的聯(lián)合，有相加協(xié)同作用。這一研究結(jié)果提