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文檔簡(jiǎn)介
1、磺胺類藥物(SAs)是畜牧業(yè)生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用的一類化學(xué)合成抗菌藥,其具有性質(zhì)穩(wěn)定,易于保存以及副作用低等優(yōu)點(diǎn)。然而過(guò)量該類藥物使用會(huì)引起人的過(guò)敏性反應(yīng),且有可能致癌?;前奉愃幬镌趧?dòng)物性食品中殘留引起的生態(tài)環(huán)境污染和人類健康危害已倍受關(guān)注,因此許多國(guó)家對(duì)磺胺類藥物最高殘留量(MRL)均做了明確的規(guī)定。
目前用于磺胺類藥物殘留的檢測(cè)方法很多,如氣相色譜法(GC)和質(zhì)譜法(MS)、高效液相色譜法(HPLC)等多種理化方法。雖然這些方法
2、靈敏,準(zhǔn)確,但是樣品前處理步驟繁瑣,花費(fèi)時(shí)間長(zhǎng),費(fèi)用高,限制了它的廣泛使用。因此研究開發(fā)一種快速簡(jiǎn)便的磺胺類藥物殘留檢測(cè)技術(shù)已迫在眉睫。酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法(ELISA)以及膠體金免疫層析技術(shù)(GICA)具有快速、簡(jiǎn)便、特異性好和靈敏度較高等優(yōu)點(diǎn),是藥物殘留檢測(cè)的一種有效方法。
本研究的目的是建立分泌抗磺胺類藥物單克隆抗體雜交瘤株,為建立磺胺類藥物免疫學(xué)檢測(cè)方法基礎(chǔ)材料。
本研究采用化學(xué)方法合成3種具有磺胺類藥物母核結(jié)
3、構(gòu)的半抗原,并通過(guò)核磁共振儀以及液-質(zhì)聯(lián)用來(lái)鑒定為預(yù)期產(chǎn)物。用重氮化法將3種合成半抗原以及5種磺胺類藥物(磺胺胍、磺胺噻唑、磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑)與牛血清白蛋白和卵清白蛋白偶聯(lián),用紫外光譜、紅外光譜鑒定偶聯(lián)成功。
用偶聯(lián)的完全抗原免疫BALB/c雌性小鼠6~7次,用雙向瓊脂擴(kuò)散法以及間接ELISA方法檢測(cè)血清效價(jià),當(dāng)間接ELISA效價(jià)達(dá)到1:6400以上時(shí),取高效價(jià)的小鼠脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合
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