藥物誘導(dǎo)后的胚胎胰腺干細(xì)胞胰島素分泌的研究.pdf_第1頁
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1、目的:探索胚胎胰腺干細(xì)胞經(jīng)藥物誘導(dǎo)成為胰島素分泌細(xì)胞(IPCs)后胰島素的分泌情況,為臨床上尋求最佳移植時(shí)間提供理論依據(jù)。
   方法:1.取引產(chǎn)14-20周的人胚胎,體外分離出的胚胎胰腺,免疫組織化學(xué)方法鑒定巢蛋白陽性細(xì)胞,培養(yǎng)獲得胚胎胰腺干細(xì)胞。
   2.經(jīng)藥物誘導(dǎo)若干天后,雙硫腙(DTZ)染色鑒定誘導(dǎo)后的細(xì)胞是否成為胰島素分泌細(xì)胞(IPCs)。
   3.分別用高濃度(20mmol/L)和低濃度(5.5m

2、mol/L)的葡萄糖溶液刺激誘導(dǎo)后的細(xì)胞,利用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)的方法測(cè)定其分別在高低濃度糖溶液刺激下胰島素釋放情況;并用ELISA檢測(cè)糖溶液刺激下該細(xì)胞群2周內(nèi)胰島素的分泌情況。
   結(jié)果:1.免疫組織化學(xué)檢測(cè)得到巢蛋白陽性細(xì)胞,證明胰腺干細(xì)胞的存在。
   2.誘導(dǎo)后細(xì)胞可被DTZ染色成猩紅色,證明IPCs形成。
   3.經(jīng)誘導(dǎo)后IPCs在兩種濃度糖溶液刺激下均分泌胰島素,且高糖溶液刺激下胰島

3、素分泌量明顯高于低糖溶液,分別為[(137.41±6.02)U/L,(106.40±8.61)U/L,t=7.228,P<0.01)]。IPCs在糖溶液刺激下第7天與第9天的胰島素分泌量明顯高于其他各天(F=38.373,q=3.033~6.085,P<0.05);第7天與第9天比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
   結(jié)論:離體條件下,胚胎胰腺干細(xì)胞經(jīng)藥物誘導(dǎo)后可分化為具有分泌胰島素能力的細(xì)胞,該細(xì)胞在糖溶液刺激下兩周內(nèi)可

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