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文檔簡介
1、本研究采用.RT-PCR技術(shù)，從馬鈴薯栽培品種大西洋(Atlantic)葉片中克隆了PPase基因，分別構(gòu)建了組成型啟動子CaMV 35S、塊莖特異表達(dá)啟動子CIPP和低溫誘導(dǎo)表達(dá)啟動子rd29A驅(qū)動的反義PPase基因植物表達(dá)載體，然后采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化優(yōu)良馬鈴薯栽培品種，獲得了轉(zhuǎn)基因馬鈴薯。取得的主要研究結(jié)果如下： 1.從馬鈴薯栽培品種大西洋葉片中提取總RNA，用RT-PCR方法擴(kuò)增到馬鈴薯無機(jī)焦磷酸酶(PPase)基因c
2、DNA，序列分析結(jié)果表明該eDNA全長673bp，開放閱讀框架636bp，編碼211個(gè)氨基酸。該P(yáng)Pase基因已在GenBank中登記，登記號為EF091820。Blast同源性比較和分析表明，該cDNA與已發(fā)表的PPase基因(GenBank accession Z36894)同源性為97.62％。 2.采用酶切和連接的方法，構(gòu)建了強(qiáng)組成型啟動子CaMV 35S、塊莖特異性表達(dá)啟動子CIPP和低溫誘導(dǎo)表達(dá)啟動子rd29A驅(qū)動的
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