1、目的:CD133+細胞是臍帶血中重要的干細胞組分之一，假設在單個核細胞心力衰竭(heart failure，HF)治療中發(fā)揮作用的是某一種組分，那么多組分共存產(chǎn)生的空間位阻效應可以影響這一組分進入心肌的數(shù)量，因而純化的單一組分移植將提高治療效果。本研究想要證實CD133+細胞在人臍帶血單個核細胞移植治療心力衰竭中所起的作用，即CD133+細胞4周后是否定植在小鼠心臟組織中，以及是否與其它組分具有協(xié)同作用。
　　方法:健康的8周齡B

2、alb/C裸小鼠26只，稱重，隨機數(shù)表法將小鼠隨機選出5只，作為假手術對照組。其余小鼠腹腔注射異丙腎上腺素(Isoprenaline，ISO)造模，5mg/Kg/天，共5天，假手術對照組腹腔注射同等體積生理鹽水作對照。小鼠常規(guī)飼養(yǎng)，觀察1周后，腹腔注射異丙腎小鼠隨機分為4組，每組5只，剪耳朵標記，命名為:CD133+細胞組、CD133-細胞組、單個核細胞組和心衰對照組。采集足月妊娠順產(chǎn)嬰兒臍帶血，3小時內(nèi)，用淋巴細胞分離液法提取單個核細

3、胞，經(jīng)免疫磁珠分離CD133+細胞和CD133-細胞，用PBS稀釋，細胞計數(shù)板計數(shù)所得細胞，細胞數(shù)在105/mL。經(jīng)鼠尾靜脈，CD133+細胞組注射CD133+細胞1mL，CD133-細胞組注射CD133-細胞1mL，單個核細胞組注射經(jīng)免疫磁珠分離后混合的單個核細胞1mL，心衰對照組和假手術對照組注射等量的PBS液1mL。常規(guī)飼養(yǎng)，4周后稱重，經(jīng)心內(nèi)穿刺取血，測血清MMP-9濃度。處死后開胸取心臟、肝臟及肺臟稱重，石蠟包埋心臟，做HE染

4、色、Masson染色檢驗心肌纖維化和心肌細胞破壞程度，免疫組化及免疫熒光染色檢測是否存在人源性細胞。
　　結果:(1)實驗前，各組小鼠體重組間比較，差異無統(tǒng)計學意義;觀察期末，異丙腎造心衰模型各組小鼠體重明顯減低(分別為21.54±1.82g，22.2±1.72g，21.16±1.99g，21.66±1.06g)，與假手術組(24.48±1.45g)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(p＜0.05），但異丙腎造心衰模型各組間比較，差異無統(tǒng)計

5、學意義;實驗前后體重變化，心衰對照組(3.3±1.42g)明顯高于假手術組(0.88±0.29g)，但異丙腎造心衰模型各組間比較(分別為3.18±0.24g，2.92±3.38g，2.96±1.47g，3.3±1.42g)，差異無統(tǒng)計學意義。實驗后異丙腎造心衰模型各組小鼠心臟、肝臟、肺臟質(zhì)量明顯大于假手術組，差異有統(tǒng)計學意義，但異丙腎造心衰模型各組間比較，差異均無統(tǒng)計學意義。(2)HE染色結果顯示，心衰造模各組小鼠，心肌排列紊亂，顯示局

6、限性心肌壞死，且主要集中在左室心尖部、左心室游離壁及室間隔位置，假手術組未發(fā)現(xiàn)明顯心肌紊亂;Masson染色可見心衰對照組(6277.97±374.18)和CD133-細胞組(6037.45±194.23)，藍色膠原纖維平均面積明顯增大(與假手術對照組相比，p＜0.05)，單個核細胞組(3290.30±424.41)和CD133+細胞組(2794.30±191.24)膠原纖維面積次之，假手術對照組(366.23±169.17)最小。與單

7、個核細胞組相比，CD133+細胞組膠原纖維平均面積更小，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。(3)免疫組化及免疫熒光染色均未在小鼠心臟組織中找到特異性人源性細胞。(4)小鼠經(jīng)鼠尾靜脈注射細胞移植后4周，MMP-9濃度檢測結果顯示，腹腔注射異丙腎上腺素造心衰模型各組，其血清MMP-9濃度，組間比較(分別為1.61±0.68ng/mL,1.90±0.27 ng/mL,1.76±0.27 ng/mL,1.97±0.33 ng/mL)，差異無統(tǒng)計

8、學意義，但是明顯高于假手術對照組(0.88±0.47 ng/mL)，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。
　　結論:(1)人臍帶血CD133+細胞可改善HF裸小鼠心肌間質(zhì)纖維化。(2)CD133+細胞與臍血中其他干細胞組分可能不存在協(xié)同作用，但可能存在空間位阻效應。(3)將人臍血干細胞移植給裸小鼠后4周，干細胞并未定植于心臟局部。(4)裸小鼠血清MMP-9濃度不是反映心衰后心肌纖維化程度的靈敏指標。(5)異丙腎上腺素5mg/Kg/d