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文檔簡介
1、γ-聚谷氨酸(γ-PGA)是由多種桿菌產(chǎn)生的一種胞外多肽,是某些微生物莢膜的主要組分。由于γ-PGA具有優(yōu)良的生物相容性、生物降解性及無毒無污染性,使得它可作為一種理想的生物材料,廣泛用作藥物緩釋材料,土壤、沙地的蓄水保濕劑,食品的水凝劑以及高強(qiáng)度纖維,具有廣泛應(yīng)用前景。本文主要對γ-PGA的分離純化過程作了初步研究。 由于γ-PGA發(fā)酵液的黏度很高,直接采用離心方法分離菌體非常困難,因此必須找出能替代離心的另一種有效除菌方法。
2、本文綜合比較了離心分離法、加壓過濾法和微濾除菌法三者之間除菌率的大小和其他因素,確定了最優(yōu)的菌體分離方法為微濾法,除菌率最高達(dá)到97.46%。同時,優(yōu)化了微濾過程的操作條件:稀釋度V<,發(fā)酵液>:V<,水>為1:2,操作溫度40℃,壓差在0.3~0.4Mpa左右,微濾膜類型選擇1.0μm的卷式膜,過程中采用反沖提高滲透通量,大大減小膜的堵塞。 除菌后的發(fā)酵液用超濾儀進(jìn)行濃縮,可明顯減少后續(xù)沉淀過程中乙醇的使用量。通過優(yōu)化實(shí)驗(yàn),確
3、定超濾最佳操作溫度為40℃,壓差0.3Mpa,濃縮比為5。整個超濾過程未出現(xiàn)穩(wěn)定過濾區(qū),膜的堵塞情況較明顯,采用適當(dāng)反沖可使?jié)B透通量提高16.1%,但效果不如微濾那么顯著。此外,比較了兩種稀釋過濾方法對超濾濃縮液的脫色效果,確定了最佳脫色方式為間歇稀釋過濾(DD),過濾次數(shù)為3~4次,濃縮液和淡液的脫色率分別達(dá)到83.89%和99.90%:而連續(xù)稀釋過濾(CD)中濃縮液和淡液的脫色率分別只有72.11%和91.05%,均低于DD。
4、 比較了不同類型的有機(jī)溶劑沉淀劑和化學(xué)沉淀劑對γ-PGA的沉淀效果,確定了最佳沉淀劑為乙醇,沉淀量達(dá)到61.99g/L。不同類型乙醇對沉淀效果無顯著影響,當(dāng)乙醇配合300g/L,硫酸銨共沉淀時沉淀量達(dá)到最大103.69g/L,但其帶來的消極因素還有待于進(jìn)一步考察。同時,確定了乙醇沉淀的最優(yōu)條件為:pH=7沉淀倍數(shù)為6,最高沉淀量可達(dá)75.44g/L。 建立了發(fā)酵液中色素的測定方法,得出最佳測定波長在440nm下,色素的相對濃度
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