兔眼藍(lán)莓葉片再生及多倍體誘導(dǎo)的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究以兔眼藍(lán)莓的杰兔品種為實(shí)驗(yàn)材料,通過組織培養(yǎng)建立了葉片再生體系及通過石蠟切片的方法對(duì)再生過程進(jìn)行了細(xì)胞組織學(xué)觀察,并采用秋水仙素處理藍(lán)莓離體莖尖誘導(dǎo)多倍體,對(duì)多倍體進(jìn)行了鑒定,為兔眼藍(lán)莓的組織快繁及培育新品種奠定了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
  1.建立了高頻、高效的兔眼藍(lán)莓離體葉片再生體系。以WPM為基本培養(yǎng)基,添加1.4~1.7mg/LZT,在離葉尖1/3的位置橫切葉片成兩部分來接種,先暗培養(yǎng)20d(25±2℃)后再光照培

2、養(yǎng)(14h光照/10h黑暗,2000lux,25±2℃)的條件下,誘導(dǎo)再生苗的效果最佳,誘導(dǎo)率最高達(dá)86.8%。
  2.離體葉片再生主要是通過直接器官發(fā)生途徑,再生的不定芽主要起源于葉脈維管束的薄壁細(xì)胞。培養(yǎng)3d左右時(shí)時(shí)脈中薄壁細(xì)胞中出現(xiàn)核大、胞質(zhì)濃厚的細(xì)胞;接著這些細(xì)胞分裂形成分生組織細(xì)胞團(tuán),然后突破葉片上表皮,進(jìn)而分化成不定芽、發(fā)育成苗。離體葉片再生苗的形成具有叢生性特性和不同步性,分生組織細(xì)胞團(tuán)最早突破葉片上表皮是在培養(yǎng)的

3、第12天左右。
  3.取離體葉片再生芽苗的莖尖進(jìn)行共培養(yǎng)誘導(dǎo)多倍體,50mg/L秋水仙素處理50d和60mg/L秋水仙素處理40d時(shí),誘導(dǎo)植株變異的效果最佳,變異率均達(dá)30%以上,有利于多倍體的發(fā)生。
  4.通過去壁低滲火焰法制片,對(duì)未經(jīng)誘導(dǎo)處理的植株與變異植株進(jìn)行染色體觀察與計(jì)數(shù),發(fā)現(xiàn)未經(jīng)處理的杰兔品種的染色體數(shù)為2n=6X=72,為六倍體,誘導(dǎo)加倍后的多倍體植株染色體數(shù)目明顯增多,大于72條。誘導(dǎo)的多倍體植株呈現(xiàn)出生

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