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![絞股藍(lán)再生體系的建立與多倍體誘導(dǎo).pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/4eeb9ab1-24b5-4b27-b38c-7e99d9515e34/4eeb9ab1-24b5-4b27-b38c-7e99d9515e341.gif)
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1、絞股藍(lán)(Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino)為葫蘆科絞股藍(lán)屬草本植物,以全草入藥,具有清熱解毒,止咳祛痰、增強(qiáng)體質(zhì)、活化細(xì)胞、鎮(zhèn)靜止痛、降壓降脂、提高免疫力等功效。我國(guó)是絞股藍(lán)植物分布和分化中心,其資源豐富。現(xiàn)有的栽培品種多數(shù)為野生資源,在其育種工作上則鮮有報(bào)道。 絞股藍(lán)的野生資源相對(duì)于需要十分有限,主要來(lái)源于人工生產(chǎn)。而絞股藍(lán)藥材生產(chǎn)主要采用無(wú)性繁殖。由于長(zhǎng)期以來(lái)。很少進(jìn)行品種選育和提純復(fù)
2、壯工作,致使其品種種性退化,藥材產(chǎn)量和質(zhì)量下降,化學(xué)成分不穩(wěn)定。為了提高絞股藍(lán)藥材的產(chǎn)量、質(zhì)量和抗性,一利用組織培養(yǎng)技術(shù),我們進(jìn)行了絞股藍(lán)快繁再生體系的研究;二在建立的絞股藍(lán)再生體系上利用秋水仙素對(duì)其進(jìn)行多倍體的誘導(dǎo)。 快繁再生體系的建立,本實(shí)驗(yàn)采用了常用的MS培養(yǎng)基,6-BA、NAA和IBA三種激素,利用空白對(duì)照和完全設(shè)計(jì)對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行設(shè)計(jì),篩選出在一般培養(yǎng)條件(培養(yǎng)室溫度為25℃,每日光照14h,光照強(qiáng)度為1300-1500Lx
3、)下的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L、最佳增殖培養(yǎng)基MS+6-BA1.0mg/L+IAA0.5mg/L和最佳生根培養(yǎng)基MS+IBA2.0mg/L+NAA1.0mg/L,并煉苗移栽成活。 多倍體的誘導(dǎo),我們利用秋水仙素,采用了浸泡法和濾紙法兩種方法進(jìn)行。浸泡法和濾紙法都選取了3個(gè)秋水仙素濃度、3個(gè)處理時(shí)間和相同的材料—莖尖進(jìn)行誘導(dǎo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明以浸泡法在秋水仙素0.25﹪濃度下處理2d最佳,加倍率
4、為72.73﹪,純合體率為87.50﹪。誘導(dǎo)處理后的材料經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng),再進(jìn)行染色體檢測(cè)。采用壓片法(卡寶品紅染色)對(duì)其進(jìn)行莖尖染色體的數(shù)目鑒定。本實(shí)驗(yàn)把核型分析作為實(shí)驗(yàn)的一部分,進(jìn)行3個(gè)時(shí)間的預(yù)處理,3個(gè)時(shí)間的固定和3個(gè)時(shí)間的解離,然后壓片,染色,鏡檢鑒定,攝像,進(jìn)行核型分析。二倍體的核型為2n=2x=22=1M+3m+7sm,獲得的四倍體為2n=4x=44。 最后在移栽成活后進(jìn)行葉片長(zhǎng)寬,氣孔密度,氣孔大小,保衛(wèi)細(xì)胞長(zhǎng)度和寬度
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