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![牦牛角性狀候選基因的克隆、表達(dá)分析及MicroRNA研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/2912319d-22ad-43c3-8553-2f94a1df2055/2912319d-22ad-43c3-8553-2f94a1df20551.gif)
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1、無(wú)角牦牛便于管理,減少牛群之間的爭(zhēng)斗傷害,避免不必要的經(jīng)濟(jì)損失。目前有關(guān)牦牛無(wú)角性狀調(diào)控主效基因及機(jī)理的研究尚屬空白。本研究以無(wú)角牦牛和有角牦牛為研究對(duì)象,利用分子生物技術(shù)克隆牦牛角性狀候選基因,并分析候選基因及其MicroRNA的表達(dá)量差異,以期篩選影響牦牛無(wú)角性狀的主效基因,為無(wú)角牦牛的培育提供一些理論依據(jù)。試驗(yàn)研究結(jié)果如下:
1.克隆獲得牦牛C1H21orf62、RXFP2和OLIG2基因的完整編碼區(qū)(CDS)。C1H2
2、1 orf62CDS區(qū)全長(zhǎng)為510bp,編碼161個(gè)氨基酸。C1H21orf62蛋白是一種親水性蛋白,含有13個(gè)潛在的磷酸化位點(diǎn),無(wú)跨膜域和信號(hào)肽;RXFP2基因CDS區(qū)全長(zhǎng)為2213bp,編碼737個(gè)氨基酸。RXFP2是疏水性蛋白,含有28個(gè)潛在的磷酸化位點(diǎn),RXFP2蛋白1~21位氨基酸存在信號(hào)肽,無(wú)跨膜域:OLIG2基因CDS區(qū)全長(zhǎng)為651bp,編碼216個(gè)氨基酸。OLIG2是一種親水性蛋白,含有29個(gè)潛在的磷酸化位點(diǎn),但無(wú)跨膜域
3、和信號(hào)肽。
2.通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分析了6個(gè)角性狀候選基因的表達(dá)量,結(jié)果表明SYNJ1、FOXL2和GCFC1基因mRNA相對(duì)表達(dá)量在牦牛無(wú)角和有角角基組織中差異不顯著;C1H21orf62基因在角基組織中mRNA相對(duì)表達(dá)量無(wú)角極顯著高于有角;RXFP2基因在角基組織中mRNA相對(duì)表達(dá)量無(wú)角顯著高于有角,說(shuō)明牦牛無(wú)角性狀可能與C1H21orf62、RXFP2基因mRNA的轉(zhuǎn)錄豐度相關(guān)。OLIG2基因僅在無(wú)角角基組織中表
4、達(dá),而在有角角基組織不表達(dá),說(shuō)明牦牛無(wú)角性狀可能與OLIG2基因的表達(dá)相關(guān)。
3.通過(guò)軟件預(yù)測(cè)牦牛OLIG2基因的靶標(biāo)MicroRNA:bta-miR-302b、bta-miR-302c和bta-miR-302d,并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分析其表達(dá)量,結(jié)果表明bta-miR-302b、bta-miR-302c和bta-miR-302d在牦牛無(wú)角、有角角基組織中均表達(dá),但是其表達(dá)量差異不顯著,推測(cè)牦牛OLIG2基因在牦牛角基
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