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文檔簡介
1、本試驗以牦牛為研究對象,選取3月齡牦牛胎牛角組織,利用免疫組化研究FOXL2、CDH1和OLIG1等角發(fā)育候選蛋白在胎牛角部組織表達的定位;利用DNA測序技術和TA克隆篩選了GHR等生長發(fā)育相關基因;采用ELISA方法測定了牦牛血液中甲狀腺激素(T4)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)、生長激素(GH)、胰島素(Ins)和睪酮(T)等激素;利用動物血細胞和血清生化分析儀測定了30項血液生理生化指標;使用R軟件的pls包,對牦牛4項體尺數(shù)據(jù)和性別
2、、角性狀、基因型、5項激素指標和血液生理生化指標進行偏最小二乘建模。目的在于探索牦牛生長發(fā)育基因與部分體尺性狀有關的遺傳標記位點和篩選牦牛角發(fā)育的候選蛋白,為探討牦牛的生長性能選育和培育無角牦牛新品種積累了基礎資料。研究結(jié)果如下:
1、免疫組化結(jié)果顯示:CDH1蛋白在有角、無角角部皮膚中均表達。在無角牦牛角部表皮和毛囊組織中表達強于有角牦牛,推測其與角部表皮多層液泡角化細胞的增殖有關,可能更多的參與毛囊的發(fā)育;OLIG1蛋白在
3、有角牦牛角部表皮組織中的表達量高于無角牦牛,在無角牦牛角部毛囊組織中不表達,推測其更多參與表皮細胞增殖和表皮多層液泡角化細胞的的增殖分化;FOXL2蛋白僅在有角牦牛角部表皮組織表達,在無角牦牛角部皮膚組織中不表達,推測FOXL2蛋白與角部毛囊組織發(fā)育無關,與表皮多層液泡角化細胞的增殖分化有關。FOXL2蛋白可以作為調(diào)控牦牛角發(fā)育的候選蛋白。
2、試驗檢測了1歲齡有角、無角牦牛群體的30項血液生理生化指標、5項激素水平和4項體尺
4、數(shù)據(jù)。結(jié)果表明兩群體間體尺、激素水平差異不顯著(P>0.05),11項生理生化指標差異極顯著(P<0.01),5項生理生化指標差異顯著(P<0.05)。初步發(fā)現(xiàn)有角牦牛與無角牦牛在高原低氧適應、肝代謝、腎代謝以及骨質(zhì)形成方面存在一定差異。
3、測序結(jié)果發(fā)現(xiàn)GHR基因第7內(nèi)含子缺失3bp堿基,實驗群體大多數(shù)為GHR基因野生型,與野牦牛(Bos mutus)基因型一致。突變型個體與瘤牛、家牛、水牛、芬蘭艾爾郡乳牛和山羊基因型一致。
5、復相關分析發(fā)現(xiàn)GHR基因型與白細胞、總蛋白、白蛋白、球蛋白、堿性磷酸酶、葡萄糖、總膽固醇等顯著相關(P<0.05),與乳酸脫氫酶存在極顯著相關(P<0.01)。因此GHR基因該位點的插入缺失可能影響機體的生長發(fā)育、免疫,以及機體對低氧環(huán)境的適應性。
4、通過R軟件pls包,以體重、體高、體斜長和胸圍作為因變量,對牦牛生長性狀與性別、角型、基因型、生長激素和血液生理生化指標進行偏最小二乘的建模。對于體重,選取主成分為8個,發(fā)現(xiàn)對
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