黃花蒿的抑菌活性及有效成分的初步分離研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本項研究以黃花蒿為供試植物,采用不同的溶劑及提取方法對其進行提??;用不同的生物測定方法測定了提取物對五種病原菌的生物活性,并對提取物中的活性組分進行了追蹤及初步的分離。 1、不同方法提取黃花蒿浸膏 四種不同的提取方法提取黃花蒿的各種有機物質,提取率由大到小分別為:微波輔助萃取法>室溫攪拌提取法>恒溫浸提法>室溫浸提法;其中提取率最高的葉的水平行提取物的提取率分別為14.55%、11.84%、11.15%和10.19%。根

2、據實驗的成本和應用前景,室溫攪拌提取法對提取物的提取經濟有效。 2、黃花蒿提取率的比較 黃花蒿不同部位有機物質的提取率,葉的最高,根次之,莖最低;不同溶劑提取結果表明,水提取物的提取率最高,石油醚I的提取率最低;不同方法提取結果表明,平行提取法優(yōu)于順序提取法;黃花蒿葉的水的平行提物的提取率為12.12%,順序提取物為10.19%;黃花蒿葉的石油醚I的平行提物的提取率為5.56%。丙酮溶劑的平行提取物中,葉的提取率為6.9

3、4%,莖的提取率為4.89%,根的提取率為9.63%。 3、黃花蒿對煙草及煙草青枯病菌的生物活性 黃花蒿的水提取物對煙草青枯病菌有一定的抑制作用,室內生物測定結果表明,3 g/L的水提取物對煙草青枯病菌的抑菌圈直徑為1.5 cm(48 h)。不同濃度的黃花蒿水提物對煙草種子的萌發(fā)速度存在著不同程度的影響,對煙草幼苗根的生長也有不同的抑制作用,且隨著濃度的增大抑制作用加強,濃度大于1 g/L的溶液對根長度的抑制作用一直保持

4、在45%以上。田間實驗結果表明,黃花蒿莖葉的粉碎物對煙草青枯病有一定的防治效果,但防效并不高;黃花蒿提取青蒿素之后的殘渣對煙草青枯病幾乎沒有效果。 4、黃花蒿對四種病原真菌的生物活性 室內生物測定結果表明,黃花蒿浸提物對玉米小斑病菌及小麥紋枯病菌具有良好的抑制作用,對煙草赤星病菌及棉花枯萎病菌的抑制效果相對較差:黃花蒿葉的丙酮提取物對玉米小斑病菌的菌絲生長抑制率為83.67%,對小麥紋枯病菌的抑制率為89.55%,抑制中

5、濃度分別為0.2056 g/L,0.1828 g/L;葉的提取物的抑菌效果優(yōu)于莖的提取物,根的效果最差;平行提取物的抑菌率高于順序提取物:各種溶劑提取的黃花蒿提取物對同一種菌的抑制作用差別較大,其中丙酮提取物的生物活性最好。 5黃花蒿浸提物的抑菌活性物質的追蹤分離采用硅膠柱層析法對黃花蒿葉的丙酮平行提取物進行活性追蹤分離,以石油醚(60-90℃):丙酮(13:1,11:1,9:1,7:1,5:1,3:1,1:1,1:2,1:3)洗脫,控

6、制洗脫劑流速在300mL/h,每40min收集一份,共分離得到48組分。以石油醚(60-90℃):丙酮=3:1(v/v)作為薄層層析的展開劑,點樣;合并活性大小相似的組分,共得到20個組分。進一步活性追蹤結果表明,F(xiàn)3組分的活性最好。 系統(tǒng)生測的結果表明:3g/L的F3組分對玉米小斑病菌及小麥紋枯病菌菌絲生長的抑制率分別是90.45%,100%;F3對玉米小斑病菌的菌絲生長的EC50值為0.0824g/L,對小麥紋枯病菌抑制菌絲

7、生長的毒力相對較強,其EC50值為0.02230 g/L。 對F3進一步分離,得到三種活性物質,物質Ⅰ,物質II和物質Ⅲ,采用濾紙片法對三種病原進行測試:物質Ⅱ的1 g/L的溶液對玉米小斑病菌和小麥紋枯病菌均有很好的抑制效果,抑菌圈直徑直徑分別為4.0鋤和4.61Acm,說明物質Ⅱ是活性物質,而且主要表現(xiàn)在對病原真菌的菌絲具有抑制效果?;钚晕镔|Ⅱ對玉米小斑病菌孢子的萌發(fā)具有一定抑制作用,濃度越高,對孢子萌發(fā)的抑制作用越大。濃度為

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