1、目的：研究IL-33/ST2軸對人T淋巴細胞亞群分化的影響及損傷的胸膜間皮細胞修復作用，從而探討IL-33/ST2軸在結(jié)核性胸腔積液中的免疫學作用。
　　方法：募集結(jié)核性胸腔積液患者18例，惡性胸腔積液患者6例，正常健康人6例，應用RT-PCR、Wstern-blot兩種方法從基因和蛋白水平檢測結(jié)核性胸腔積液中IL-33的主要來源。并比較三組樣本外周血或胸腔積液淋巴細胞IL-33表達水平；檢測Th1/Th2/Th17/Treg細胞

2、上ST2的表達，進一步從基因水平檢測IL-33對各T細胞亞群特異性轉(zhuǎn)錄因子及細胞因子mRNA表達的影響，反映IL-33對T細胞亞群誘導分化作用。應用免疫熒光技術(shù)檢測來自TPE患者的壁層胸膜標本發(fā)現(xiàn)，胸膜間皮細胞上ST2的表達，體外建立胸膜間皮細胞的損傷模型，檢測不同時間點重組人細胞因子IL-33/ST2軸對損傷的胸膜間皮細胞的早期及長期修復作用。
　　結(jié)果：
　　（—）結(jié)核性胸腔積液中提取的胸膜間皮細胞和淋巴細胞都表達IL-

3、33蛋白，且胸膜間皮細胞上IL-33蛋白的表達量顯著高于淋巴細胞（n=6,p<0.05)。結(jié)核性（n=6）和惡性(n=6)胸腔積液患者胸水淋巴細胞IL-33的表達量均高于相應的外周血（p<0.05）。結(jié)核性胸腔積液組和惡性胸腔積液組外周血淋巴細胞IL-33蛋白的表達量均高于健康對照組（p<0.05），但是結(jié)核性胸腔積液和惡性胸腔積液外周血淋巴細胞中IL-33蛋白的表達量無顯著差異（p>0.05）。從mRNA水平上檢測的結(jié)果和蛋白水平的檢

4、測結(jié)果是一致的。
　?。ǘ┰赥h1/Th2/Th17/Treg細胞亞群上均檢測到ST2mRNA的表達，在Th2和Treg誘導環(huán)境下ST2 mRNA表達增加，而在Th1/Th17環(huán)境下表達是降低的。IL-33誘導結(jié)核性胸腔積液中Th2和Treg細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子GATA3和FOXP3 mRNA表達升高，同時Th2細胞表達的2型細胞因子IL-4、IL-5、IL-13 mRNA表達也增高，IL-33和IL-4在促進Th2細胞表達GAT

5、A3 mRNA時具有協(xié)同作用，在缺乏IL-4時IL-33也能誘導GATA3 mRNA表達增加。IL-33增強能TGF-β誘導的Treg細胞FOXP3 mRNA的表達，但是在缺乏TGF-β時，IL-33不能引起Treg細胞表達FOXP3 mRNA表達增加。IL-33抑制Th1/Th17細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子T-bet和RORC mRNA表達，Th17表達的IL-17AmRNA也下調(diào)。IL-33對這些細胞亞群的誘導分化作用是通過作用于ST2受體

6、實現(xiàn)的，當預先用抗人的ST2抗體加入培養(yǎng)基中，IL-33所引起上述誘導分化作用基本消失，但是IL-33不能阻斷IL-4刺激引起的Th2細胞GATA3 mRNA的增加，說明Th2細胞GATA3的表達時非ST2依賴性質(zhì)的；
　?。ㄈ妹庖邿晒鈱W技術(shù)檢測首次發(fā)現(xiàn)：胸膜間皮細胞上高表達ST2。體外胸膜間皮細胞的損傷實驗表明：IL-33通過促進胸膜間皮細胞的活性及促進其增值而促進胸膜間皮細胞的早期及遠期修復。
　　結(jié)論：胸膜間皮細