1、 目的：觀察腹腔置管引流術后重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)大鼠血清及腹水IL-6、TNF-ɑ濃度以及腸液sIgA水平、腸組織CD4+T淋巴細胞浸潤程度的變化規(guī)律,旨在探討腹腔置管引流對SAP大鼠腸粘膜免疫屏障功能損傷的影響及作用機制。方法：將72只Wistar大鼠按隨機數(shù)字表法分為3組：SAP組(A組)、SAP引流組(B組)、假手術對照組(C組)。每組24只,各組又分術后6、12、24h

2、三個時相點,每時相點分配8只大鼠。所有大鼠適應性喂養(yǎng)1周,術前12h及術后禁食不禁水。三組動物模型制備方法如下,A組：參照Aho法,腹腔注射3%戊巴比妥鈉溶液麻醉(0.1 ml/100 g),腹壁正中切口入腹,尋找胰膽管,動脈夾夾閉肝門部膽管,仔細觀察胰膽管的走行方向及其在十二指腸的開口位置,在胰膽管十二指腸開口處對側腸壁以4號兒科頭皮針穿刺進入胰膽管,連接微量輸液泵,以3 ml/h的速度注射5%牛黃膽酸鈉溶液(0.1 ml/100 g

3、),注射完畢后用動脈夾夾閉近十二指腸端的胰膽管10分鐘。肉眼見胰腺組織充血、水腫、出血、壞死等改變后,表明大鼠SAP動物模型制備成功,關腹。B組：SAP模型制備成功后,在大鼠胰周部位置入引流管,切口旁戳孔引出,固定好引流管后,分層關腹在引流管尾端接上引流袋。C組：僅進行開腹手術,翻動胰腺3-5次后關腹。所有大鼠均于術后補液,按40ml/kg體重于背部皮下注射37℃生理鹽水,間隔12h注射一次,共兩次。分別于術后的第6、12、24h采集血

4、液、腹 水標本,凍存以備檢測。于各時相點獲取血液標本后,處死所配屬的大鼠。采集腸液標本,凍存以備檢測；取腸組織置于4%中性甲醛緩沖液中固定；取胰腺組織凍存。采用全自動生化分析儀檢測血清及腹水淀粉酶活性, ELISA法測定血清及腹水IL-6、TNF-a濃度,胰腺組織冰凍切片HE染色觀察病理變化,ELISA法檢測腸液sIgA水平,腸組織作CD4+T淋巴細胞免疫組化染色。結果：分別于術后6、12、24h,通過各項指標的檢測,有以下發(fā)現(xiàn)：①術后

5、同時相點A、B兩組大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6、TNF-a水平均顯著高于C組大鼠水平,且術后同時相點A、B兩組大鼠胰腺組織水腫及出血壞死程度均較C組大鼠顯著加重。②對腸液sIgA的檢測發(fā)現(xiàn),術后各時相點A、B兩組大鼠均顯著低于C組大鼠水平,且A、B兩組大鼠腸組織中CD4+T淋巴細胞浸潤程度也均顯著低于C組。③術后同時相點B組大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6、TNF-a水平均顯著低于A組大鼠水平；B組大鼠胰腺組織水腫及出血壞死程度較A組明