1、目的：本文旨在闡明ADDLs對AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運影響的機制，揭示ADDLs降低AMPA受體在細胞膜表面表達，導致認知功能障礙的分子機制。本研究將拓寬研究AD疾病的新思路，并為基于AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運的神經(jīng)保護治療和藥物研發(fā)提供新的靶點。
　　方法：應(yīng)用培養(yǎng)的大鼠海馬神經(jīng)元利用細胞膜組分提取、免疫印跡方法觀察ADDLs對大鼠海馬神經(jīng)元GluA1-3亞基在細胞膜表達的影響;D1R激動劑和抑制劑、中藥左旋千金藤啶堿（l-SPD）對AD

2、DLs降低GluA1亞基磷酸化及AMPA受體在細胞膜上表達的保護作用。應(yīng)用APP轉(zhuǎn)基因小鼠，通過morris水迷宮行為學實驗比較APP轉(zhuǎn)基因小鼠和WT小鼠在空間記憶方面的差異及機制;采用細胞膜組分提取、免疫印跡方法比較APP轉(zhuǎn)基因小鼠和WT小鼠海馬GluA1-3亞基在細胞膜表面表達的差異及其機制;腹腔注射左旋千金藤啶堿l-SPD，觀察是否改善記憶及認知功能及是否改善GluA1-3亞基在細胞膜表面的表達。
　　結(jié)果：1.ADDLs降

3、低AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運。免疫印跡結(jié)果顯示在培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元，給予500nM的ADDLs處理，在3h、6h、24h均降低了AMPA受體GluA1/GluA2亞基細胞膜表面表達量，對GluA3亞基細胞膜表面表達沒有明顯影響，對GluA1-3亞基總蛋白表達量均沒有明顯影響。
　　2.ADDLs影響AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運是通過調(diào)控GluA1亞基磷酸化實現(xiàn)的。對GluA1亞基磷酸化水平檢測結(jié)果顯示ADDLs(3h，6h，24h)顯著地降低了G

4、luA1亞基Ser-845以及Ser-831磷酸化水平。
　　3.激活D1R-PKA信號通路能干預ADDLs對AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運的影響。給予D1R激動劑SKF81297(3μ M)可以上調(diào)ADDLs降低的AMPA受體GluA1/GluA2亞基細胞膜表面表達量以及GluA1亞基Ser-845磷酸化水平;D1R抑制劑SCH23390(10μM)可以抑制這種上調(diào)。
　　4.左旋千金藤啶堿l-SPD(3μM)對ADDLs降低AMP

5、A受體跨膜轉(zhuǎn)運具有保護作用。3μM l-SPD對ADDLs降低的AMPA受體GluA1/2亞基細胞膜表面表達量以及GluA1亞基Ser-845磷酸化水平有明顯恢復作用。
　　5.水迷宮行為學實驗顯示APP小鼠和WT小鼠在記憶認知方面存在明顯差異;細胞膜組分檢測結(jié)果顯示APP小鼠GluA1/GluA2亞基細胞膜表面表達量明顯降低;GluA1亞基磷酸化水平檢測結(jié)果顯示APP小鼠GluA1亞基Ser-845和Ser-831磷酸化水平均明

6、顯下調(diào)，腹腔注射l-SPD(10 mg/kg)，APP小鼠記憶認知得以改善，GluA1/GluA2亞基細胞膜表面表達上調(diào)，GluA1亞基Ser-831和Ser-845磷酸化水平有一定恢復。
　　結(jié)論：1.ADDLs降低AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運。2.ADDLs影響AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運是通過調(diào)控GluA1亞基磷酸化實現(xiàn)的。3.激活D1R-PKA信號通路能干預ADDLs對AMPA受體跨膜轉(zhuǎn)運的影響。4.l-SPD對ADDLs降低的AMPA受