1、人們投入巨大的努力來(lái)制造各種生物材料來(lái)滿足某些特殊的臨床需要。本研究中，我們將聚左旋乳酸(poly(L-lactic acid)，PLLA)、多壁碳納米管(multiwalled carbon nanotubes，MWNTs)和羥基磷灰石(hydroxyapatite，HA)混懸液通過(guò)電紡工藝制造出一種新型的引導(dǎo)性組織再生膜和組織工程支架材料。
　　 MWNTs/HA納米顆粒在膜中分布均勻，膜的降解性能得到了很大的改善。細(xì)胞學(xué)實(shí)

2、驗(yàn)證實(shí)，與對(duì)照組PLLA膜相比，在PLLA/MWNTs/HA膜上，牙周膜細(xì)胞(periodontal ligament cells，PDLCs)粘附和增殖增加了30％，而牙齦上皮細(xì)胞(gingival epithelialcells，GEC)則減少了30％。將PDLCs接種于PLLA/MWNTs/HA膜上，并將二者的復(fù)合體植入裸鼠腿部的肌袋中。組織學(xué)檢查結(jié)果顯示貼附在膜上的PDLCs在體內(nèi)功能良好。這種新型膜材料雖然只是單層結(jié)構(gòu)，但是卻

3、表現(xiàn)出良好的雙重生物學(xué)功能，能夠很好的滿足引導(dǎo)性組織再生術(shù)的要求。與市場(chǎng)上正在出售的GTR膜或正在研究的GTR膜相比，這種膜可以簡(jiǎn)化生產(chǎn)步驟，降低生產(chǎn)費(fèi)用并避免了臨床應(yīng)用過(guò)程中可能出現(xiàn)的錯(cuò)誤。而且，這種膜在術(shù)后不需要去除。PLLA/MWNTs/HA膜在GTR和組織工程方面擁有巨大的應(yīng)用潛力。
　　 本研究初步探索人羊膜基質(zhì)細(xì)胞(human amniotic mesenchymal cells，hAMC)作為骨組織工程種子細(xì)胞的潛

4、力。對(duì)人羊膜基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)，將第3代PDLCs在含有地塞米松(0.1μmol/L)、維生素C(50 mg/L)和β-磷酸甘油鈉(10 mmol/L)的DMEM培養(yǎng)液進(jìn)行成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)1周，進(jìn)行茜素紅染色，計(jì)數(shù)鈣化結(jié)節(jié)形成數(shù)量，并進(jìn)行免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色以檢測(cè)Ⅰ型膠原和堿性磷酸酶的表達(dá)。利用免疫組織(細(xì)胞)化學(xué)染色檢測(cè)羊膜及hAMC中FasL的表達(dá)。結(jié)果顯示人羊膜基質(zhì)細(xì)胞經(jīng)過(guò)成骨誘導(dǎo)后，可見明顯鈣化結(jié)節(jié)形成，平均每孔18個(gè)。鈣化結(jié)節(jié)處

5、細(xì)胞Ⅰ型膠原和堿性磷酸酶表達(dá)陽(yáng)性。人羊膜組織中細(xì)胞及體外培養(yǎng)的hAMC均可檢測(cè)到FasL的陽(yáng)性表達(dá)。這提示人羊膜基質(zhì)細(xì)胞有潛力成為一種較為理想的骨組織工程的種子細(xì)胞。
　　 本研究探索了人羊膜基質(zhì)細(xì)胞和電紡聚乳酸/羥基磷灰石(Poly(L-lactic acid)/hydroxyapatite，PLLA/HA)膜構(gòu)建骨組織工程細(xì)胞/支架復(fù)合體。分離培養(yǎng)羊膜基質(zhì)細(xì)胞，利用MTT法檢測(cè)PLLA和PLLA/HA膜浸提液對(duì)羊膜基質(zhì)細(xì)胞增

6、殖的影響；將第3代羊膜基質(zhì)細(xì)胞與PLLA和PLLA/HA膜在成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液中復(fù)合培養(yǎng)，在第1周和第4周時(shí)進(jìn)行組織學(xué)檢查，并在第4周時(shí)進(jìn)行免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色以檢測(cè)Ⅰ型膠原和堿性磷酸酶的表達(dá)。結(jié)果顯示PLLA和PLLA/HA膜浸提液對(duì)羊膜基質(zhì)細(xì)胞均無(wú)明顯細(xì)胞毒性。羊膜基質(zhì)細(xì)胞與兩種膜材料復(fù)合培養(yǎng)后，細(xì)胞增殖明顯，而且可以觀察到鈣化結(jié)節(jié)的形成，鈣化結(jié)節(jié)處細(xì)胞Ⅰ型膠原和堿性磷酸酶表達(dá)陽(yáng)性。這表明人羊膜基質(zhì)細(xì)胞與電紡聚乳酸/羥基磷灰石膜可以共同