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文檔簡介
1、背景:晚期糖基化受體終產物(Receptor for advanced glycation endproducts,RAGE)是一種在多種腫瘤中高表達的癌基因,但是它在原發(fā)性肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用尚未明確。
方法:通過檢測RAGE在肝癌細胞系Huh7及HepG2中的表達,我們發(fā)現(xiàn)RAGE在Huh7中表達更高,因此選擇Huh7進行下一步研究。我們通過向Huh7細胞轉染入靶
2、向RAGE的特異性siRNA、加入RAGE抗體以及RAGE的配體HMGB1來研究RAGE對肝癌細胞增殖的影響。
結果:研究發(fā)現(xiàn)RAGE可以調控肝癌細胞的增殖。靶向RAGE的siRNA下調RAGE的表達及RAGE特異性抗體可以抑制肝癌細胞Huh7的增殖,同時,siRNA干擾RAGE的表達可以阻滯細胞于G1期,并抑制DNA的合成(p<0.01);而RAGE的配體,HMGB1可以促進細胞的增殖,并增加處于S期的細胞數(shù)目(p<0.
3、05)。RT-PCR,qRT-PCR和Western Blot的結果表明,RAGE和HMGB1可以調節(jié)Huh7中核轉錄因子(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer ofactivated B cells,NF-κB p65)的表達。并且,應用Hoechst33258染色Huh7細胞發(fā)現(xiàn),RAGE特異性抗體可以誘導細胞凋亡,而HMGB1能抑制細胞凋亡,RT-PCR的結果也顯示RAGE特異性抗體可
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