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1、實(shí)驗(yàn)室在中恢8015經(jīng)60Co-γ輻射獲得的突變體材料庫(kù)中發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)黃綠葉突變體w390和g160,本文對(duì)這兩個(gè)突變體進(jìn)行了形態(tài)學(xué)鑒定、光合特性測(cè)定、圖位克隆等方面的研究,為進(jìn)一步闡明水稻葉色的分子機(jī)理提供了基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
w390在全生育期均呈黃綠色;葉片中檢測(cè)不到葉綠素b的存在,葉綠素a和類胡蘿卜素的含量較野生型分別降低了50.6%和44.8%;透射電鏡結(jié)果顯示,突變體中類囊體數(shù)量明顯減少,基粒垛疊方向異常。農(nóng)藝
2、性狀調(diào)查結(jié)果顯示,突變體的株高、單株有效穗數(shù)、每穗總粒數(shù)和每穗實(shí)粒數(shù)較野生型分別降低了12.0%、22.3%、18.5%和27.6%。采用突變體與粳稻日本晴雜交構(gòu)建的F2群體進(jìn)行遺傳分析,結(jié)果表明該突變性狀受一對(duì)隱性核基因控制(x2=0.57<x20.05=3.84,P=0.4494)。利用該群體中的黃綠葉隱性單株將突變基因定位至水稻第10染色體上長(zhǎng)臂約71.8-kb的基因組區(qū)域內(nèi)。序列比對(duì)發(fā)現(xiàn),位于該區(qū)域內(nèi)的OsCA O1在第8外顯子
3、發(fā)生了2個(gè)單堿基突變,導(dǎo)致第394和396位的亮氨酸和甘氨酸分別突變?yōu)榻M氨酸和谷氨酸,說(shuō)明w390是OsCA O1的一個(gè)新的功能喪失型等位突變體。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)野生型和突變體中15個(gè)葉色相關(guān)基因的表達(dá),結(jié)果顯示,僅類胡蘿卜素合成途徑關(guān)鍵基因OsCRTIS在野生型與突變體中存在臨界差異(P=0.0367),說(shuō)明OsCA O1的突變并未在轉(zhuǎn)錄水平上改變?nèi)~色相關(guān)基因的表達(dá)。
g160也是一個(gè)全生育期葉片均呈黃綠色的突變體
4、。與野生型相比,突變體的總光合色素、葉綠素a和葉綠素b的含量分別降低了38.6%、44.7%和41.7%,而類胡蘿卜素未發(fā)生顯著變化。突變體的凈光合速率、最大量子產(chǎn)量、實(shí)際量子產(chǎn)量和相對(duì)電子傳遞率也分別比野生型降低了56.3%、37.7%、60.0%和55.5%。采用突變體與粳稻02428雜交構(gòu)建的F2群體進(jìn)行遺傳分析,表明該突變性狀受一對(duì)隱性核基因控制(x2=0.21<x20.05=3.84,P=0.5960)。利用該F2群體及其衍生
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