水稻白綠葉基因WGL1的定位與克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、葉色突變體是研究光合色素合成,葉綠體發(fā)育調(diào)控和光合作用機制的重要材料。目前的研究結(jié)果表明,水稻葉色相關(guān)基因在12條染色體上均有分布,已報道與葉色相關(guān)的水稻基因已有70多個。葉綠素是植物進行光合作用的主要色素,在植物的生長發(fā)育中起著重要的作用,葉綠體是光合作用的主要場所,光合色素鑲嵌在葉綠體的類囊體膜上。葉綠素合成過程中需要一系列酶的參與,NADPH-原葉綠素酸酯氧化還原酶(POR)是一種光依賴型酶,在催化原脫植基葉綠素(pchlide)

2、還原成脫植基葉綠素(chlide)的過程中有關(guān)鍵性作用。水稻中有兩種POR亞型,即OsPORA和OsPORB。OsPORA和OsPORB在黑暗條件下均有表達,但光照條件下OsPORA迅速減少;OsPORB表達穩(wěn)定不變。OsPORA負責(zé)PLB的形成,在水稻整個生育期葉綠素的合成過程中起到關(guān)鍵作用,與擬南芥AtPORA和AtPORB功能相似;OsPORB是高光條件下,葉片中葉綠素的合成所必需的,與擬南芥AtPORC和AtPORB功能相似。<

3、br>  粳稻品種‘日本晴’(Nipponbare)經(jīng)甲基磺酸乙酯(EMS)誘變后獲得了穩(wěn)定遺傳的白綠葉突變體wgll,該突變體在四葉期前葉片為淡綠色,隨著葉片的伸長老葉葉尖變白同時伴有褐色斑點,但是抽穗期之后葉片恢復(fù)為淡綠色。光合色素含量測定結(jié)果表明,wgll突變體葉色異常與葉綠素a、葉綠素b及類胡蘿卜素含量降低相關(guān);透射電鏡觀察分析表明,突變體葉肉細胞中葉綠體的數(shù)目以及葉綠體中基粒數(shù)目減少,導(dǎo)致葉綠體發(fā)育受損;遺傳分析結(jié)果顯示wgl

4、l突變體為單隱性核基因控制。利用圖位克隆的方法將目的基因WGL1定位在第10染色體上,編碼OsPORB的候選基因Os10g35370在編碼區(qū)出現(xiàn)單堿基替換?;パa實驗結(jié)果驗證了突變體的表型變化確實是由WGL1突變引起。RT-PCR表達分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),WGL1基因在水稻的莖、葉、鞘及穗中都有表達,但在葉片中表達量最高,根中幾乎不表達;GUS染色也獲得了相同的結(jié)果。這些研究結(jié)果為POR蛋白的功能研究以及葉綠體發(fā)育調(diào)控機制的研究提供了重要的理論基

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