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![肺泡形成基因P311在高氧肺損傷中作用的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/16/23/0f1bce93-280f-42f0-bfe6-502e0d258b28/0f1bce93-280f-42f0-bfe6-502e0d258b281.gif)
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文檔簡介
1、第一部分肺泡形成基因P311在高氧所致支氣管肺發(fā)育不良小鼠肺組織中的表達(dá)及意義
目的:探討肺泡形成基因P311在高氧所致支氣管肺發(fā)育不良小鼠肺組織中的表達(dá)及意義。
方法:將64只(生后4日齡)新生昆明(KM)小鼠隨機(jī)分為空氣組(對照組)和高氧組(實(shí)驗(yàn)組),每組32只,分別交由母鼠喂養(yǎng),每只母鼠帶8~10只新生鼠,空氣組置于室內(nèi)常壓空氣中喂養(yǎng),高氧組置于同一室內(nèi)密閉氧艙中持續(xù)吸入氧濃度>90%的醫(yī)用氧氣,空氣組及高氧組
2、分別在喂養(yǎng)第1天、3天、7天、14天后取其肺組織(每組8只),通過蘇木精-伊紅染色(Hematoxylin-eosin staining)觀察肺組織病理變化并鑒定造模是否成功;進(jìn)一步通過免疫組織化學(xué)染色和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)法(Real-Time PCR)檢測P311表達(dá)部位和基因;酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測P311蛋白。
結(jié)果:肺組織病理變化顯示:高氧組與空氣組比較,隨著吸入高濃度氧氣時(shí)間的延長,肺組織表現(xiàn)為肺泡數(shù)
3、目減少、體積增大、肺泡結(jié)構(gòu)簡單化。免疫組織化學(xué)染色后P311主要分布在肺泡壁及肺泡隔膜生長點(diǎn)的肺組織中,在空氣組小鼠肺組織中呈弱陽性反應(yīng),而在高氧組小鼠肺組織中呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。新生小鼠P311基因及蛋白表達(dá)在吸入高濃度氧氣第7天時(shí)達(dá)高峰;與空氣組比較,高氧組P311基因及蛋白表達(dá)增高(P<0.05);
結(jié)論:長時(shí)間吸入高濃度氧氣可導(dǎo)致小鼠肺泡結(jié)構(gòu)紊亂,肺泡簡單化,證明成功構(gòu)建高氧所致支氣管肺發(fā)育不良的動(dòng)物模型。P311基因表達(dá)及
4、蛋白含量在高氧組均高于空氣組,證實(shí)P311可促進(jìn)肺泡發(fā)育,可能是促進(jìn)肺損傷修復(fù)的新的調(diào)控因子。
第二部分肺泡形成基因P311在高氧所致肺損傷小鼠肺組織中的作用研究
目的:了解肺泡形成基因P311在高氧暴露所致肺損傷小鼠肺組織中可能的作用;
方法:將64只(60日齡)成年昆明(KM)小鼠隨機(jī)分為空氣組和高氧組,空氣組置于室內(nèi)常壓空氣中飼養(yǎng),高氧組暴露于同一室內(nèi)密閉的氧艙中,持續(xù)吸入氧濃度>90%的醫(yī)用氧氣,空
5、氣組及氧氣組分別喂養(yǎng)第1天、3天、7天、14天后取其肺組織(每組8只),蘇木精-伊紅染色(Hematoxylin-eosin staining)觀察肺組織病理變化并鑒定造模是否成功;免疫組織化學(xué)染色和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)法(Real-Time PCR)檢測P311表達(dá)和基因;酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測P311蛋白;
結(jié)果:成年小鼠高氧組隨著吸入高濃度氧氣時(shí)間的延長,可見炎性細(xì)胞浸潤、肺泡充血、水腫、肺泡腔增大、肺間質(zhì)
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