1、啟動(dòng)子是基因表達(dá)調(diào)控的重要元件，在植物轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體所選擇的啟動(dòng)子中，應(yīng)用最為廣泛的是組成型啟動(dòng)子，如CaMV35S。然而組成型啟動(dòng)子會(huì)導(dǎo)致目的基因產(chǎn)物在整個(gè)植株大量積累，可能會(huì)影響植株的其他組織器官的正常生長(zhǎng)發(fā)育，從而可能導(dǎo)致死亡。而組織特異性啟動(dòng)子（如根、莖、花、果特異表達(dá)啟動(dòng)子）可以將目的基因特異的表達(dá)于目標(biāo)器官或組織，一方面避免基因的組成型表達(dá)對(duì)其他組織器官生長(zhǎng)發(fā)育的影響，從而更好的進(jìn)行基因功能驗(yàn)證，另一方面，也能夠更具有目的性

2、的在某個(gè)特定組織器官特異性高效表達(dá)，進(jìn)行高效地轉(zhuǎn)基因育種。本研究基于柑橘基因組RNA-seq數(shù)據(jù)，用各個(gè)不同組織器官材料進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量驗(yàn)證，篩選出幾個(gè)柑橘果實(shí)特異性啟動(dòng)子，并開展了轉(zhuǎn)基因驗(yàn)證工作。
　　本實(shí)驗(yàn)具體從以下幾個(gè)方面獲得結(jié)果:
　　1)根據(jù)全基因組RNA-seq數(shù)據(jù)的分析，篩選得到果實(shí)中特異性高表達(dá)的七個(gè)基因。通過實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)七個(gè)基因的表達(dá)模式進(jìn)行了分析，篩選到了一個(gè)在果實(shí)中表達(dá)水平遠(yuǎn)高于（高低110倍）葉片

3、和花的基因。
　　2)啟動(dòng)子的克隆與表達(dá)載體構(gòu)建?？寺〉玫絧CitPDILP啟動(dòng)子，該啟動(dòng)子長(zhǎng)1913bp;利用PMV2-DR5載體構(gòu)建pCitPDILP啟動(dòng)子的GUS融合表達(dá)載體和一個(gè)陽性對(duì)照35S啟動(dòng)子的GUS融合表達(dá)載體;PMV2-DR5同時(shí)擁有GUS和YFP兩種報(bào)告基因;
　　3)瞬時(shí)表達(dá)驗(yàn)證啟動(dòng)子的果實(shí)特異性。用農(nóng)桿菌滲入瞬時(shí)轉(zhuǎn)化的方法，將帶有pCitPDILP啟動(dòng)子的載體和帶有35S啟動(dòng)子的載體分別轉(zhuǎn)入了番茄;載