1、蛋白酪氨酸磷酸酶(BmPTP)是細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及細胞周期的重要調(diào)控分子，同時在細胞生長、繁殖、分化、轉(zhuǎn)化、免疫等諸多領(lǐng)域也發(fā)揮著重要作用。關(guān)于該酶的研究主要集中在哺乳動物中，昆蟲中蛋白酪氨酸磷酸酶的研究還很少，尤其缺乏免疫功能方面的研究。本文通過生物信息學(xué)的方法對家蠶中的蛋白酪氨酸磷酸酶進行了鑒定和分類，同時確定了對BmPTP免疫功能的研究。研究通過感染病菌后檢測BmPTP的表達變化，并通過過表達以及干涉BmPTP的方式檢測該基因在Bm

2、E細胞中的免疫功能變化，然后對家蠶個體進行了干涉實驗，以對細胞實驗的結(jié)果進行驗證。本實驗主要的研究結(jié)果如下:
　　1.家蠶蛋白酪氨酸磷酸酶的鑒定與分類
　　從日本家蠶數(shù)據(jù)庫（http://sgp.dna.affrc.go.jp/KAI KObase/）與本實驗室家蠶數(shù)據(jù)庫（http://www.silkdb.org/silkdb/）中篩選到了46個含有蛋白酪氨酸磷酸酶催化結(jié)構(gòu)域的序列，最終獲得了41個基因的完整序列。對獲得的

3、41個完整基因進行了進化樹比對，并按照催化結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)的不同對它們進行了分類。同時確定了以BmPTP(BMgn016959)為免疫功能研究對象。并對其進行了時期表達譜分析和組織表達譜分析。
　　2.BmPTP功能研究
　　首先，檢測了BmPTP在細胞及個體感染黑胸敗血芽孢桿菌（Bacillusbombyseptieus），沙雷氏菌（Serratia marcescens）和家蠶BmNPV（Bombyx morinucleopo

4、lyhedrovirus）病毒后的表達變化，發(fā)現(xiàn)了在家蠶在感染BmNPV病毒后，BmPTP在細胞及個體中48 h后表達量有明顯的上升;在細菌感染后的某些組織中BmPTP的表達量也有明顯的變化。為了對BmPTP在免疫功能上的作用進行進一步探究，構(gòu)建了BmPTP真核及原核表達載體，并通過western blot和考馬斯亮藍染色的方法對表達進行了檢測。然后構(gòu)建了蛋白酪氨酸磷酸酶活性檢測系統(tǒng)，并檢測到了BmPTP的活性。同時還合成了BmPTP的