1、本實(shí)驗(yàn)從一群發(fā)病鴨的病料中分離到一株鴨肝炎病毒，并建立了檢測(cè)鴨肝炎病毒抗原和血清抗體的ELISA快速檢測(cè)方法，取得了如下結(jié)果： 1．鴨病毒性肝炎病毒株的分離鑒定及部分理化特性的研究。 對(duì)湖北省內(nèi)某疑似鴨病毒性肝炎感染鴨病料的收集，通過細(xì)菌分離、病毒分離、中和試驗(yàn)、動(dòng)物回歸試驗(yàn)、雛鴨保護(hù)試驗(yàn)以及病毒的電鏡觀察，分離到一株鴨病毒性肝炎I型病毒株，對(duì)分離毒株的部分生物學(xué)特性進(jìn)行了初步研究。 2．鴨病毒性肝炎血清抗體EL

2、ISA快速檢測(cè)方法的建立和初步應(yīng)用。 將通過鴨胚傳代的病毒經(jīng)過純化后，作為包被抗原，建立了一種檢測(cè)血清中DHV抗體的間接ELISA方法。通過對(duì)ELISA反應(yīng)條件的系列測(cè)定，確定了各組分的最適工作條件：抗原包被濃度為3.75μg，血清稀釋約1:160時(shí)，陽(yáng)性血清OD450值(P)接近1.0，陰性血清值(N)為0.125，P/N值最大。陰性和陽(yáng)性分界明顯；通過對(duì)40份陰性鴨血清的檢測(cè)結(jié)果，確定陰陽(yáng)性臨界點(diǎn)為0.2。根據(jù)建立的ELIS

3、A方法及最佳反應(yīng)條件，檢測(cè)了一批雛鴨攜帶母源抗體及其消長(zhǎng)情況以及一批免疫雛鴨的抗體消長(zhǎng)情況。結(jié)果表明，本試驗(yàn)建立的間接-ELISA法可用于鴨血清中鴨肝炎病毒抗體水平的檢測(cè)以及未免疫鴨群鴨病毒性肝炎感染情況的檢測(cè)。 3．鴨病毒性肝炎病毒雙抗體夾心ELISA快速檢測(cè)方法的建立和初步應(yīng)用。 以純化的鴨抗DHV IgG為包被抗體，兔抗DHV IgG為第二抗體，通過ELJSA反應(yīng)條件的優(yōu)化選擇，建立了檢測(cè)DHV抗原的夾心ELISA

4、法。結(jié)果表明，鴨抗DHV IgG的最佳包被濃度為約2μg/ml，兔抗DHV IgG的最適工作濃度約為3.4μg/ml；與已知鴨病毒性肝炎標(biāo)準(zhǔn)病毒呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，與已知的陰性樣品及其它禽類病毒(NDV、IBV、DP、MDPV、IBDV、MDV)無交叉反應(yīng)；用建立的ELISA方法對(duì)97份疑為鴨肝炎的病料進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果有73份呈陽(yáng)性。經(jīng)過比較測(cè)定，夾心ELISA法要比瓊脂免疫擴(kuò)散方法要敏感64倍，說明本方法在檢測(cè)鴨病毒性肝炎病毒抗原方面具有特