1、海參（sea cucumbers，Holothurians）屬棘皮動(dòng)物門（Echinodermate）海參綱（Holothurioidea）動(dòng)物，具有較高的食用與藥用價(jià)值。其體內(nèi)的海參皂苷是最重要的活性物質(zhì)之一，具有抗腫瘤、抗菌、溶血、免疫調(diào)節(jié)等廣泛藥理作用，是評(píng)價(jià)海參質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)之一。由于受分類和生長(zhǎng)環(huán)境的影響，不同海參所含皂苷結(jié)構(gòu)及比例有所不同。本論文結(jié)合 HPLC-ELSD、HPLC-MS技術(shù)建立了海參皂苷分析及鑒定方法，并利用

2、該方法對(duì)食用、藥用海參中品質(zhì)最高的仿刺參皂苷進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)，建立了多種海參的海參皂苷特征圖譜。從而彌補(bǔ)了多年來(lái)海參皂苷缺乏標(biāo)準(zhǔn)品難以定量的空白，為海參質(zhì)量評(píng)價(jià)及不同海參的判別、歸屬提供可靠方法和理論依據(jù)，對(duì)建立海參全面、規(guī)范的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)具有現(xiàn)實(shí)指導(dǎo)意義。本論文主要包括以下兩部分：
　　采用60％乙醇，75℃回流對(duì)新鮮仿刺參中海參皂苷進(jìn)行提取，應(yīng)用有機(jī)溶劑萃取法、大孔樹(shù)脂吸附法及HPLC對(duì)仿刺參中的HolotoxinA1進(jìn)行分離純化，

3、通過(guò)波譜數(shù)據(jù)確定分離制備的海參皂苷單體為三萜皂苷HolotoxinA1，HPLC-ELSD分析其純度可作為對(duì)照品。采用ODS-SPE小柱對(duì)不同海域仿刺參樣品進(jìn)行前處理，以 Hypersil Gold C18（150mm×2.1mm，3μm）色譜柱，5mmolL-1醋酸銨—乙腈溶液梯度洗脫建立海參皂苷HolotoxinA1的HPLC-ELSD定量分析方法，并對(duì)不同海域仿刺參中 HolotoxinA1的含量進(jìn)行了定量比較。研究表明建立的HP

4、LC-ELSD方法基線穩(wěn)定，靈敏度高，各色譜峰分離良好，在0.2μgmL-1~25μgmL-1線性關(guān)系良好（r=0.999），檢測(cè)限為0.05μgmL-1，具有良好的重復(fù)性和可靠性。定量分析可知來(lái)源于不同海域的5種仿刺參中HolotoxinA1含量有較大差別，仿刺參中HolotoxinA1含量由南向北依次提高，以韓國(guó)東海岸產(chǎn)仿刺參中含量最多（588.20μg-1），福建產(chǎn)仿刺參中含量最少（21.33μg-1）。本部分建立了一種準(zhǔn)確、靈敏

5、的評(píng)價(jià)仿刺參中海參皂苷質(zhì)量的方法，解決了多年來(lái)海參皂苷因成分復(fù)雜難以分析，缺乏對(duì)照品難以定量等問(wèn)題，為今后海參產(chǎn)品的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了依據(jù)。
　　根據(jù)所建立的海參皂苷制備及分析方法，采用 HPLC-MS技術(shù)，對(duì)2種刺參科（Stichopodidae）海參和3種海參科（Holothuriidae）海參進(jìn)行分析，通過(guò)HPLC-MS色譜峰中的每個(gè)分子離子峰，推斷它們可能存在的海參皂苷化合物，建立了不同海參的海參皂苷特征圖譜。5種海參受海域與