1、本文主要從以下幾方面進行了論述:
　　第一部分
　　目的:探討PARPI在心肌梗死后大鼠心臟組織中的蛋白表達變化和活性變化,以及同期心臟組織中相關(guān)炎性細胞因子白細胞介素1β(IL-1β)、白細胞介素(IL-6)、白細胞介素(IL-10)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)的蛋白表達情況和PARP抑制劑-氨基苯甲酰胺(-AB)對大鼠心室的結(jié)構(gòu)與功能的影響。
　　方法:結(jié)扎冠狀動脈左前降支(LAD)近端建立心肌梗死模型,隨機分為

2、心肌梗死組,梗死低劑量和高劑量干預(yù)組,另設(shè)假手術(shù)組,在心臟同樣部位穿線但不結(jié)扎LAD以及正常對照組。梗死干預(yù)組給予PARP抑制劑-AB腹腔注射。測定術(shù)后1天的PARPI活性和蛋白表達及同期相關(guān)炎性細胞因子IL-1β,IL-6,IL-10,TNF-ɑ在心臟組織中的蛋白表達,并行心臟超聲檢測評價心功能。
　　結(jié)果:超聲心動圖顯示,心梗組與假手術(shù)組比較,心梗術(shù)后小時和小時的左心室射血分數(shù)(EF)顯著減少(P<0.05),而低劑量和

3、高劑量干預(yù)組與心梗組比較,術(shù)后小時和小時的左心室EF值皆有顯著增加(P<0.05)。術(shù)后小時和小時的心梗組短軸縮短率(FS)與假手術(shù)組比較,也有明顯降低(P<0.05),而術(shù)后小時和小時的低劑量和高劑量干預(yù)組的FS值與心梗組比較皆有明顯升高(P<0.05)。到第7天只有高劑量干預(yù)組明顯改善心臟功能(P<0.01)。且各時間點比較,低劑量組和高劑量組間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。酶活性檢測顯示,PARP1酶活性在術(shù)后立即升高

4、(P<0.05),此后持續(xù)降低,但仍舊高于正常組(P<0.05)。高劑量3AB干預(yù)能明顯降低心肌組織內(nèi)PARP1活性(P<0.05),而低劑量不明顯。免疫組化顯示的PARP1蛋白表達量亦呈同樣趨勢,且高、低劑量AB干預(yù)皆能有效降低PARP1表達量(P<0.05)。與假手術(shù)組比較心梗組和干預(yù)組大鼠心肌組織非梗死區(qū)IL-6和TNF-ɑ的蛋白表達從小時至周逐漸升高,AB干預(yù)在第至7天能發(fā)揮明顯抑制作用(P<0.0

5、5)。而IL-10&nbsp;則在術(shù)后逐漸降低,AB干預(yù)在各時間點亦能明顯降低其表達(P<0.05)。和假手術(shù)組比較,NF-κB和AP-1的活性自第天始明顯高于假手術(shù)組(P<0.05),第天進一步升高(P<0.01)。AB干預(yù)后NF-κB和AP-1活性明顯降低,但高、低劑量組間比較無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論:PARP-1通過NF-κB和AP-1途徑,調(diào)節(jié)大鼠心肌非梗死區(qū)炎性細胞因子基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控,參與了梗

6、死后心肌功能的損傷。-AB改善大鼠心梗后心室重塑,提高心功能,其機制可能與-AB抑制了PARP1在心梗后心肌組織中炎性細胞因子表達調(diào)節(jié)中所起的多聚ADP核糖合成酶催化活性有關(guān)。
　　第二部分
　　目的:探討PARPI在人外周血單個核細胞中蛋白表達變化和活性變化,以及同期心臟組織中相關(guān)炎性細胞因子白細胞介素1β(IL-1β)、白細胞介素10(IL-10)的蛋白表達情況,以及對轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的DNA結(jié)合能力的影響。
　

7、　方法:分離和原代培養(yǎng)的健康人外周血單個核細胞,給予LPS刺激小時后,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測炎性細胞因子IL-1β和IL-10的蛋白表抑制達水平,結(jié)果于nm波長處測定的光密度值(A值)表示。并觀察PARP1劑-氨基苯甲酰胺(AB)對上述炎性細胞因子表達的影響。提取培養(yǎng)細胞全蛋白和核蛋白,采用Western Blotting法檢測LPS刺激前后培養(yǎng)細胞內(nèi)PARP1蛋白表達水平及AB對蛋白表達的影響,結(jié)果使用灰度值表示。使用

8、EMSA方法檢測AB對轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的活性影響。
　　結(jié)果:原代培養(yǎng)的人外周血單個核細胞經(jīng)LPS刺激,其PARP1活性和蛋白表達量明顯增高量依賴性。(P<0.05)。AB明顯抑制其活性和蛋白表達(P<0.05),且呈劑LPS刺激后HPBM分泌炎性細胞因子IL-1β和IL-10水平上調(diào)(P<0.05),皆在小時達到峰值,核蛋白中NF-κB活性明顯高于其空白對照組。AB干預(yù)后呈劑量依賴性降低IL-1β和IL-10

9、的表達和分泌(P<0.05),并能顯著降低NF-κB活性(P<0.01)。
　　結(jié)論:在LPS誘導(dǎo)人外周血單個核細胞炎性反應(yīng)產(chǎn)生細胞因子過程中,PARP1的表達和酶活性水平明顯增高。PARP1可能是炎性反應(yīng)免疫激活過程中的重要調(diào)節(jié)因子之一,可通過參與局部和全身免疫反應(yīng)。分泌,NF-κB途徑,調(diào)節(jié)HPBM炎性細胞因子基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控,3AB降低NF-κB活性,減少炎性因子IL-1β和IL-10其機制可能與-AB抑制了PARP