1、研究背景：
　　 類風濕性關節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis RA)是一種以關節(jié)和關節(jié)周圍組織的非感染性炎癥為主的異質性、系統(tǒng)性、慢性自身免疫性疾病，以關節(jié)腫痛、強直、畸形和功能障礙為主要臨床表現。具體癥狀表現為雙手、腕和足關節(jié)的對稱性多關節(jié)炎，亦可累及膝、髖等大關節(jié)。RA的病因至今未明，目前仍屬一種難治性疾病，尚無特異有效根治本病的療法和藥物，誤診率高、不合理用藥率較高、致殘率高，而中醫(yī)藥治療因為其副作用較小、并

2、且在緩解疼痛、提高患者生存質量方面有著較好的效果而具有一定的優(yōu)勢。
　　 研究基礎：
　　 滑膜炎是RA的基本病理表現，TLR是存在于細胞上介導炎性介質產生的重要受體，其主導的細胞信號轉導通路在宿主防御反應中起到了關鍵的作用，特別是在作為連接天然免疫和獲得性免疫的橋梁時顯然異常重要。然而TLR的過度表達及活化將導致嚴重的機體免疫功能紊亂。目前人們做了大量的研究證明了TLR異?；罨閷У难装Y反應與RA的發(fā)病及進展，尤其是

3、滑膜炎癥的發(fā)生發(fā)展和進展有著密不可分的聯系。
　　 研究目標：
　　 RA隸屬中醫(yī)學“痹癥”之中“歷節(jié)病”的范疇。仲景祖師早在千年前就認識到了其存在。其對歷節(jié)病病因病機的認識、辨證施治的方法和所創(chuàng)立的針對性方劑桂枝芍藥知母湯至今仍在指導著臨床實踐。本研究通過文獻尋找桂枝芍藥知母湯治療RA的理論基礎，并建立Ⅱ型膠原誘導動物RA模型，通過體內外實驗觀察桂枝芍藥知母湯對Toll樣受體細胞信號轉導通路相關指標作用的研究分析，探索

4、其治療RA的作用機理。為桂枝芍藥知母湯治療RA提供更深層次的客觀依據。
　　 研究方法：
　　 理論研究：通過回顧桂枝芍藥知母湯的組方意義、臨床應用以及歷代醫(yī)家對RA病名、病因、病機的認識、相關臨床實踐及實驗研究，探討RA以《金匱要略》理論基礎為指導，從歷節(jié)病論治，并使用桂枝芍藥知母湯治療可能性和可靠性。
　　 實驗部分以CIA大鼠為受試對象，觀察桂枝芍藥知母湯煎劑對CIA模型鼠關節(jié)評分、關節(jié)體積、關節(jié)腫脹度及關

5、節(jié)病理組織學的影響，使用SP免疫組化法、酶聯免疫吸附法、蛋白質印跡法和PCR法對實驗大鼠滑膜組織中的相關指標：炎性細胞因子IL-1、IL-6、IL-17及TNF-α，核轉錄因子NF-κB，接頭蛋白MyD88，Toll樣受體2、4、9以及TLR逆調控因子SIGIRR進行了檢測，從細胞、蛋白及基因三個層面揭示桂枝芍藥知母湯對RA治療的作用機理。
　　 研究結果：
　　 從病因病機、癥狀及治法分析得出RA可以從歷節(jié)病論治，實驗

6、顯示桂枝芍藥知母湯水煎劑對CIA大鼠關節(jié)腫脹有一定的抑制作用，能減輕關節(jié)滑膜的增生程度及關節(jié)軟骨的損傷程度。桂枝芍藥知母湯各劑量組分別不同程度的表現出了對CIA大鼠滑膜組織中TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κB、IL-1、IL-6、IL-17、TNF-α表達的抑制作用，CIA大鼠模型組滑膜組織中SIGIRR的表達較空白對照組有所降低，而桂枝芍藥知母湯高、低劑量組SIGIRR的表達卻明顯高于模型組。
　　 研究結論

7、：
　　 ①RA可以從“歷節(jié)”病論治。
　　 ②桂枝芍藥知母湯可以明顯減輕CIA模型大鼠足腫脹度、降低關節(jié)評分并減輕關節(jié)病理組織改變。
　　 ③TLR信號轉導通路介導的炎癥反應和RA的發(fā)病相關。
　　 ④桂枝芍藥知母湯對TLR信號通路的轉導有抑制作用，并可能藉此減輕RA炎癥反應，起到緩解病情的作用。
　　 ⑤TLR信號通路負調控因子的被抑制可能導致在RA滑膜炎的發(fā)生或進展。
　　 ⑥桂枝芍

8、藥知母湯可能可以通過激活TLR信號通路負調控因子SIGIRR的表達來起到抑制TLR信號通路所介導的RA滑膜炎癥反應的作用。
　　 研究創(chuàng)新：
　　 使用多種技術手段（SP免疫組化、酶聯免疫吸附、蛋白質印跡及PCR法）對實驗大鼠滑膜組織中的多個指標進行了檢測，從細胞、蛋白及基因三個層面揭示桂枝芍藥知母湯治療RA的作用機理。被檢測指標涵蓋了Toll樣受體信號轉導通路的多個重要位點，且重要指標采用不同技術路線進行了重復檢驗，具