1、背景：新疆是我國最重要的棉花生產基地之一，而干旱、冷害、鹽漬等因素一直是限制棉花產量重要因素。光合系統(tǒng)Ⅱ在植物光合作用中發(fā)揮著重要的作用，同時在應對環(huán)境脅迫中扮演著重要角色。PsbR蛋白是光合系統(tǒng)Ⅱ中的一個小分子蛋白，近年來的研究表明PsbR在光合系統(tǒng)Ⅱ的組裝等過程中發(fā)揮著重要作用。
　　目的：為了提高棉花的光合作用效率，本實驗以棉花（陸地棉）為研究材料對光合系統(tǒng)Ⅱ中的PsbR基因進行克隆，然后進行序列與功能的初步探索，以期為提高

2、棉花光合作用效率奠定理論基礎。
　　方法：本研究以擬南芥光合系統(tǒng)Ⅱ PsbR蛋白序列作為探針序列對棉花 EST數據庫進行同源性檢索，然后下載同源性序列并利用CAP3軟件拼接，采用Primer Premier5.0軟件對拼接序列設計引物，通過RT-PCR的方法從棉花葉片擴增目的基因序列，然后采用不同的生物學軟件對基因序列信息進行分析。采用實時熒光定量的方法對棉花根、莖、葉、花、子房與纖維不同組織中的基因相對表達進行分析；利用酶切的方

3、法構建了植物表達載體PZP35S-GhPsbR并轉入野生型擬南芥和煙草中；通過抗生素篩選及 PCR方法檢測獲得的轉化植株，并對轉基因煙草植株進行了光合與熒光指標的測定。
　　結果：⑴通過電子克隆得到一個699bp棉花PsbR基因的序列，經RT-PCR和測序驗證后，將其ORF序列提交到Genbank，獲得序列登錄號為KF944428；預測該基因編碼139個氨基酸，蛋白分子量為14.26kDa；⑵多序列比對結果顯示，棉花PsbR蛋白與

4、牧豆樹、馬鈴薯等具有較高的相似性，與蕪菁、菠菜等的相似率較低；在進化關系上，棉花PsbR蛋白與葡萄、蓖麻、楊樹等親緣關系上較近；與黃瓜、蕪菁、煙草等進化關系較遠；⑶實時熒光定量結果表明 PsbR基因在棉花不同組織中均表達，但不同組織中表達水平不同，在葉片中表達量最高；⑷分別采用4℃、NaCl、ABA和PEG6000四種方式處理后，棉花幼苗葉中的PsbR基因的表達水平都發(fā)生了不同程度的下降，隨脅迫時間的延長不同脅迫處理下GhPsbR基因的

5、相對表達量呈現出先略微上升隨后下降的趨勢。⑸構建了植物過表達載體 PZP35S-GhPsbR，并通過農桿菌轉化野生煙草和擬南芥，經抗生素篩選與PCR鑒定，共獲得了12株轉基因煙草和4株擬南芥植株，轉基因植株在表型上與非轉基因植株沒有明顯差異。光合與熒光指標的測定和研究結果也表明，正常生長條件下在煙草植株中過表達GhPsbR基因對煙草幼苗的光合與熒光指標的影響均不顯著。
　　結論：從棉花葉片中克隆得到了GhPsbR基因cDNA序列，