1、植物內(nèi)生真菌是指在其整個生活史或者生活史的某一階段生活在植物組織體內(nèi)的一類并不引起明顯病害癥狀的真菌。它們有著豐富多樣的具有廣泛生物學(xué)活性的代謝產(chǎn)物。從植物中分離獲得能夠產(chǎn)生活性物質(zhì)的內(nèi)生真菌菌株有著重要的理論和現(xiàn)實意義。胡桃楸(Juglans mandshurica Maxim)的樹皮、羽狀復(fù)葉、果實及果實外果皮都有很高的藥用價值。胡桃楸有抗腫瘤、消炎鎮(zhèn)痛、抗氧化等功用。目前對胡桃楸的抗腫瘤活性研究比較深入,但還沒有關(guān)于胡桃楸內(nèi)生真菌

2、的報道。本研究從胡桃楸樹皮中分離到14株內(nèi)生真菌,采用細胞毒篩選模型(MTT法)對這些內(nèi)生真菌發(fā)酵液的抗腫瘤活性進行了檢測。結(jié)果表明,有3株真菌的發(fā)酵液對人肝癌細胞系HepG2細胞生長有明顯的抑制作用。以ITS1和ITS4為引物,對活性菌株FSNQ0002、FSNQ0004和FSNQ0011的ITS序列進行了PCR擴增,并對擴增產(chǎn)物進行了測序,系統(tǒng)進化分析發(fā)現(xiàn)FSNQ0002、FSNQ0004和FSNQ0011可以歸為木霉屬長枝木霉(T

3、richoderma longibrachiatum)?；钚宰罡叩腇SNQ0002的發(fā)酵液對人肺癌細胞系SPC-A-1和人胃癌細胞系SGC都有很強的抑制作用,而對人正常肝細胞系HL-7702毒性較小。FSNQ0002發(fā)酵液體內(nèi)抗H22實驗表明,FSNQ0002發(fā)酵液對體內(nèi)腫瘤抑制率為31.53%。用正丁醇萃取可以有效地富集發(fā)酵液中的有效成分,發(fā)酵液中有效成分經(jīng)65℃處理2h后活性仍然穩(wěn)定,這些特性為活性產(chǎn)物的分離純化和穩(wěn)定性研究打下了基