1、目的： 探討多西紫杉醇、中成藥得力生及兩藥聯(lián)合對(duì)肺癌細(xì)胞株A549細(xì)胞生長(zhǎng)、基因表達(dá)的影響及其機(jī)制和相互作用形式。 方法： 采用MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制率，在顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)特點(diǎn)，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng)（RT-PCR）法測(cè)定凋亡相關(guān)基因、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因及促血管新生基因mRNA的表達(dá)變化。 結(jié)果： （1）得力生、多西紫杉醇及兩藥聯(lián)合作用48小時(shí)后，A549細(xì)胞存

2、活率均明顯降低，與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)意義（P均<0.05）；得力生與多西紫杉醇聯(lián)合處理A549細(xì)胞，其作用強(qiáng)度大于任何一種單藥（P均<0.05），兩藥間相互作用形式表現(xiàn)為相加作用，甚至為協(xié)同作用。（2）多西紫杉醇聯(lián)合得力生作用A549細(xì)胞24小時(shí)后亦可見典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變。進(jìn)一步的流式檢測(cè)結(jié)果表明：得力生與多西紫杉醇聯(lián)合處理后，其對(duì)A549細(xì)胞早期凋亡與得力生、多西紫杉醇單藥作用強(qiáng)度相當(dāng)，但其對(duì)A549細(xì)胞晚期凋亡的影響大于任何一

3、種單藥（P均<0.05）。（3）RT-PCR結(jié)果顯示，得力生單藥作用于A549細(xì)胞24小時(shí)后，survivin、β1整合素亞基基因的mRNA表達(dá)明顯降低，與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)意義（P均<0.05）；但α5整合素亞基、VEGF和bFGF基因的mRNA表達(dá)無明顯下降，與對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)意義（P>0.05）。（4）多西紫杉醇單藥作用于A549細(xì)胞24小時(shí)后，α5整合素亞基基因、bcl2/bax基因表達(dá)比例明顯降低，與對(duì)照組相比，差異

4、有統(tǒng)計(jì)意義P均<0.05）；但VEGF、bFGF、β1整合素亞基基因的mRNA與對(duì)照組相比表達(dá)無明顯下降，差異無統(tǒng)計(jì)意義（P>0.05）。（5）得力生與多西紫杉醇聯(lián)合處理后，其對(duì)A549細(xì)胞survivin、β1整合素亞基、α5整合素亞基基因表達(dá)和bcl2/bax基因表達(dá)比例均有明顯抑制作用（P均<0.05），但對(duì)VEGF、bFGF基因表達(dá)無影響（P>0.05）。進(jìn)一步研究顯示，得力生與多西紫杉醇聯(lián)合作用后，對(duì)A549細(xì)胞survivi

5、n、β1整合素亞基基因mRNA表達(dá)的影響與得力生單藥相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。多西紫杉醇與得力生聯(lián)合作用后，對(duì)A549細(xì)胞α5整合素亞基基因、bcl-2/bax比值的影響與多西紫杉醇單藥相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。即在基因水平上兩藥間相互作用形式為：兩種單藥互不干擾，均能發(fā)揮各自對(duì)某些基因表達(dá)的抑制作用，且具有互補(bǔ)性。 結(jié)論： 多西紫杉醇聯(lián)合得力生可明顯抑制A549細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡，且與任一單藥相比，兩藥聯(lián)合作用