1、目的： 1、觀察沙利度胺(thalidomide)與化療藥物順鉑(DDP)聯(lián)合應用對A549人肺腺癌細胞生長抑制及凋亡的影響； 2、觀察沙利度胺對肺腺癌A549細胞VEGF、BFGF蛋白表達的影響。 方法：將A549人肺腺癌細胞株于37℃、5％CO2條件下進行培養(yǎng)。 1、待細胞呈對數(shù)生長，接種于96孔培養(yǎng)板，設空白對照組、thalidomide組、DDP組及thalidomide+DDP聯(lián)合組，經(jīng)不同濃度

2、藥物處理后，應用MTT法檢測thalidomide與DDP聯(lián)用對細胞增殖的影響，并計算兩藥聯(lián)合效應； 2、將細胞培養(yǎng)于5ml培養(yǎng)瓶，設空白對照組、thalidomide組、DDP組及thalidomide+DDP聯(lián)合組，經(jīng)不同濃度DDP(2mg/l、4mg/l)加或不加thalidomide培養(yǎng)48h后，用PI單染法流式細胞檢測細胞凋亡率； 3、采用免疫細胞化學方法檢測thalidomide處理后肺腺癌A549細胞VEG

3、F、BFGF蛋白表達的變化。 結果： 1、thalidomide與DDP聯(lián)合對A549細胞的生長抑制效應：在一定濃度范圍內，thalidomide和DDP均可抑制A549人肺腺癌細胞的生長，經(jīng)Pearson相關分析，其抑制作用呈量-效關系。DDP單用時，濃度為2.0mg/L可顯著抑制A549細胞的增殖；Thalidomide單用時，濃度為7.5mg/L可顯著抑制A549細胞的增殖。而thalidomide7.5mg/L與

4、DDP聯(lián)用時，DDP濃度為0.5mg/L時即可抑制A549細胞的生長，聯(lián)合組抑瘤作用強于單獨應用DDP組，差別具有統(tǒng)計學意義。按照兩藥合用效果公式推算，當thalidomide7.5mg/L分別聯(lián)用DDP濃度為0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、4 mg/L、8mg/L時，Q值均在0.85～1.14之間，兩者之間呈相加關系。且在一定濃度范圍內，thalidomide與DDP合用，隨時間延長其對細胞的生長抑制率增大。 2、th

5、alidomide與DDP聯(lián)合對人肺腺癌A549細胞凋亡的作用：對照組細胞凋亡率3.34％±0.1％；DDP(2mg/l)組4.92％±0.08％；DDP(4mg/l)組6.41％±0.47％；thalidomide(7.5mg/l)組15.95％±0.18％；thalidomide(7.5mg/l)+DDP(2mg/l)組17.53％±0.57％；thalidomide(7.5mg/l)+DDP(4mg/l)組72.77％±2.76％

6、，隨著DDP濃度的增加，A549細胞的凋亡率增加，thalidomide聯(lián)合DDP處理組細胞凋亡率明顯高于單藥組。 3、thalidomide7.5 mg/l作用于人肺腺癌A549細胞后，處理組的VEGF蛋白表達與未加藥組比較差異顯著。處理組的BFGF蛋白表達與未加藥組比較差異顯著。 結論： 1、沙利度胺與化療藥物DDP聯(lián)合，可增強對A549人肺腺癌細胞的生長抑制效應，當DDP濃度≥0.5mg/L時，兩者具有相加