1、目的:研究卵巢癌細(xì)胞系和組織中HSP27的表達(dá)與順鉑耐藥和患者預(yù)后的關(guān)系,以及HSP27的作用機(jī)制。
　　方法:western-blot和Real-time RT-PCR檢測卵巢癌細(xì)胞株OV2008、C13k、A2780、SKOV3、HO8910、CAOV3及si-C13K、NC組中HSP27mRNA和蛋白的表達(dá)水平;免疫組化方法檢測101例上皮性漿液性卵巢癌病人的癌組織及10例正常卵巢組織中,HSP27的表達(dá)情況,并結(jié)合臨床資料

2、分析HSP27的表達(dá)和卵巢癌病人一線化療耐藥及無瘤生存時間的關(guān)系。在卵巢癌細(xì)胞系C13K細(xì)胞中采用RNA干擾技術(shù),轉(zhuǎn)染siRNA下調(diào)HSP27的表達(dá),CCK-8法及流式細(xì)胞術(shù)檢測并比較si組和NC組細(xì)胞對順鉑藥物敏感性;細(xì)胞免疫組化檢測si組和NC組細(xì)胞中caspase-3的表達(dá)。細(xì)胞免疫熒光檢測P21的細(xì)胞定位和表達(dá)。
　　結(jié)果:HSP27在C13K細(xì)胞中的表達(dá)水平顯著高于其他5株細(xì)胞,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);C13K

3、細(xì)胞對順鉑的半數(shù)抑制濃度(IC50)明顯高于其他5株細(xì)胞系;HSP27在卵巢癌中表達(dá)較正常卵巢和良性腫瘤中明顯增高;生存分析發(fā)現(xiàn)HSP27高表達(dá)組的中位PFS顯著低于低表達(dá)組;下調(diào)HSP27的si-HSP27 C13K細(xì)胞與對照組比較,HSP27蛋白水平明顯受抑,順鉑處理后的凋亡率明顯升高,P-Akt的含量也明顯下降;免疫熒光結(jié)果顯示si-HSP27組和應(yīng)用PI3K抑制劑LY294002的細(xì)胞組中P21從細(xì)胞漿中轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核中。