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![DNA修復(fù)及細(xì)胞凋亡與人卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥關(guān)系的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/01dae8e9-1aa2-4d07-813d-960baf89e9f0/01dae8e9-1aa2-4d07-813d-960baf89e9f01.gif)
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文檔簡介
1、目的:(1)觀察順鉑導(dǎo)致人卵巢癌SKOV3細(xì)胞藥物耐受后細(xì)胞凋亡情況。探討DNA錯(cuò)配修復(fù)基因hMLH1、hMSH12的在人卵巢癌細(xì)胞SKOV3及耐順鉑人卵巢癌細(xì)胞SKOV3/DDP中的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達(dá)變化。(2)探討耐順鉑人卵巢癌細(xì)胞SKOV3/DDP中凋亡基因bax、bcl-2、caspase9的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達(dá)變化,為進(jìn)一步研究凋亡途徑異常提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。
方法:(1)在第一部分細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,采甩MTT法、Hoechst
2、免疫熒光染色觀察順鉑對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞和卵巢癌順鉑耐藥SKOV3/DDP細(xì)胞凋亡情況,檢測(cè)SKOV3fDDP細(xì)胞耐藥性。使用RT-PCR技術(shù)及Western blotting技術(shù)分別檢測(cè)順鉑敏感性人卵巢癌SKOV3細(xì)胞及耐順鉑人卵巢癌SKOV3/DDP胞中錯(cuò)配修復(fù)基因hMLH1和hMSH2的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達(dá)變化情況。
(2)在第二部分實(shí)驗(yàn)中,使用RT-PCR技術(shù)及Western-blotting技術(shù)分別檢測(cè)順鉑敏感性人卵
3、巢癌SKOV3細(xì)胞及耐順鉑人卵巢癌SKOV3/DDP細(xì)胞中凋亡相關(guān)基因bc1-2、bax、caspase9的轉(zhuǎn)錄與翻譯表達(dá)變化情況。
結(jié)果:(1)同一順鉑濃度作用下,耐順鉑人卵巢癌細(xì)胞的凋亡率明顯低于順鉑敏感性人卵巢癌細(xì)胞。順鉑敏感性人卵巢癌細(xì)胞的錯(cuò)配修復(fù)基因hMLH1和hMSH2的mRNA及蛋白表達(dá)水平均顯著高于耐順鉑人卵巢癌細(xì)胞。
(2)順鉑敏感性人卵巢癌細(xì)胞的凋亡相關(guān)基因bax、caspase9的mRN
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