高效液相色譜法測(cè)定飼料中甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑的方法研究.pdf_第1頁(yè)
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1、硝基咪唑類(nitriodazoles)藥物是一類具有5-硝基咪唑環(huán)結(jié)構(gòu)的藥物,主要用于預(yù)防和治療家禽的滴蟲(chóng)病、豬的出血性下痢及厭氧菌感染,并可在畜禽飼料中添加作促生長(zhǎng)用。獸醫(yī)臨床常用甲硝唑(metronidazole,MNZ)、地美硝唑(dimetridazole,DMZ)和異丙硝唑(ipronidazole,IPZ)等。但該類藥物具有潛在的致癌、致畸、致突變作用,動(dòng)物組織殘留嚴(yán)重威脅食品安全。歐盟、美國(guó)等已相繼禁止硝基咪唑類藥物用作

2、飼料添加劑,且規(guī)定可食性動(dòng)物組織中不得檢出該類藥物。我國(guó)也規(guī)定禁止在所有食品動(dòng)物中以促生長(zhǎng)為目的使用甲硝唑、地美硝唑及其鹽、酯及制劑。因此,在飼料、獸藥殘留監(jiān)控實(shí)踐中,尋求簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的硝基咪唑類藥物檢測(cè)方法十分必要。高效液相色譜(HPLC)法仍是最實(shí)用、最簡(jiǎn)便的方法。文獻(xiàn)報(bào)道的該類藥物HPLC檢測(cè)方法中,存在諸如僅針對(duì)單一藥物測(cè)定、采用含氯有機(jī)溶劑提?。ǘ拘源螅?、檢測(cè)限過(guò)高很難滿足檢測(cè)要求等不足。本文籍全國(guó)飼料標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)農(nóng)業(yè)

3、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定項(xiàng)目資助,篩選、優(yōu)化并確定了一種簡(jiǎn)單、快捷、重現(xiàn)性好,能同時(shí)測(cè)定飼料中甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑的HPLC方法。具體研究?jī)?nèi)容如下:
  1.色譜條件及樣品前處理方法確定優(yōu)化并確定了樣品前處理?xiàng)l件,包括樣品的提取條件和凈化條件;優(yōu)化并確定了色譜條件。飼料樣品前處理方法如下:選用乙酸乙酯提取,提取液于35℃水浴中氮吹濃縮至近干后,經(jīng)正己烷液液分配溶解于0.1 mol/L磷酸溶液中,經(jīng)MCX固相萃取柱凈化,過(guò)0.22μm濾膜

4、;HPLC測(cè)定飼料中甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑的色譜條件為:ZORBAX SB-C18柱(4.6×250 mm,5μm),甲醇-水梯度洗脫,波長(zhǎng)320 nm,柱溫30℃,流速0.8 mL/min。
  2.分析方法驗(yàn)證考察了上述所建方法的專屬性、線性、靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度等。結(jié)果顯示:該方法專屬性符合要求;甲硝唑、地美硝唑和異丙硝唑在兩種飼料中添加濃度0.02~10.0 mg/kg范圍內(nèi)線性良好;三種藥物在兩種飼料中檢測(cè)限均為0

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