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![浙江省兩地草莓灰霉病菌對異菌脲和嘧霉胺的抗藥性評價(jià)及其分子機(jī)制研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/d61fded1-176a-44b1-a57c-3787126cc19f/d61fded1-176a-44b1-a57c-3787126cc19f1.gif)
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文檔簡介
1、由赤葡萄孢菌(Botrytis cinerea Pers.)引起的草莓灰霉病是草莓的最重要病害之一,一般年份造成的損失大約20%~30%,流行年份損失可達(dá)50%以上。由于缺乏抗灰霉病的種質(zhì)資源,化學(xué)防治仍然是防治草莓灰霉病的主要措施之一。然而,由于灰葡萄孢菌的繁殖系數(shù)大、自發(fā)突變幾率高,以及存在異核和準(zhǔn)性生殖現(xiàn)象,病菌變異潛力大,在藥劑持續(xù)篩選壓力作用下,頻率極低的抗藥性突變體得以保存,其種群也不斷壯大,從而導(dǎo)致藥劑防治效果下降,甚至失
2、效。掌握田間抗藥性亞群體的頻率和抗性水平,對及時調(diào)整用藥策略,提高藥劑防治效果、減少藥劑的使用量具有較大的現(xiàn)實(shí)意義。此外,了解病菌抗性分子機(jī)制,不僅可為建立抗藥性的快速分子監(jiān)測體系、檢測田間抗藥性種群的消長動態(tài)奠定基礎(chǔ),同時也可為研究開發(fā)抗抗藥性策略提供理論依據(jù)。 本研究采用菌絲生長速率法測定采自浙江省建德市和杭州下沙區(qū)兩個草莓主產(chǎn)區(qū)的98個灰葡萄孢菌(Botrytis cinema Pers.)菌株對殺菌劑異菌脲的抗性。研究結(jié)
3、果表明建德下涯和廟頭張兩地區(qū)已存在抗異菌脲的菌系,抗性頻率達(dá)17.5%,最高抗性菌株的抗性系數(shù)為12.32。而杭州下沙和建德的楊村橋地區(qū)則尚未發(fā)現(xiàn)抗性菌系。通過擴(kuò)增和測序,比較研究了異菌脲敏感和抗性菌株BcOS1基因N-端氨基酸重復(fù)區(qū)段的526bp序列,結(jié)果發(fā)現(xiàn),抗性菌株存在兩種分子變異類型,即BcOS1的365位氨基酸從異亮氨酸(Ile)變?yōu)榻z氨酸(Ser),369和373位同時從谷氨酸(Gin)和天冬門氨酸(Asn)變成脯氨酸(Pr
4、o)和絲氨酸(Ser),以前一個類型為主,占8個抗性菌株中的7個。 以同樣方法評價(jià)上述菌株中42個菌株對嘧霉胺(pyimethanil)的抗性情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn),高抗菌株占19.05%,中抗菌株占2.38%,低抗菌株占2.38%,敏感菌株占76.19%。最抗菌株JDxy13的抗性系數(shù)高達(dá)387.3,8個高抗菌株中的7個來自建德下涯地區(qū),由此可見建德市下涯地區(qū)存在抗嘧霉胺的灰霉菌。 炭疽病是草莓上另一大病害。據(jù)文獻(xiàn)記載引起草莓
5、炭疽病的病菌至少有三個種。對來自建德市下涯和楊村橋,以及杭州下沙草莓短縮莖或匍匐莖上的44個草莓炭疽菌菌株形態(tài)學(xué)、培養(yǎng)性狀的研究表明,病菌分生孢子大小為16~20μm×4~5μm,圓柱狀,直形,兩端鈍圓,中部含有油球;培養(yǎng)基上的菌落尚未見剛毛。在PDA培養(yǎng)基上菌落特征可分兩類,其一(38個菌株)為菌落灰白色,易產(chǎn)孢;其二(6個菌株)則菌絲灰黑色,能分泌色素,導(dǎo)致培養(yǎng)基變黑色,很少產(chǎn)孢。提取所有菌株的基因組DNA,根據(jù)已經(jīng)報(bào)道的針對尖孢炭
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