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![CD133通過(guò)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/52e9ae5c-121a-4116-a13a-ec02e6274902/52e9ae5c-121a-4116-a13a-ec02e62749021.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察胃癌細(xì)胞CD133表達(dá)及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)因子與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系,進(jìn)一步探討CD133是否經(jīng)EMT促進(jìn)胃癌侵襲與轉(zhuǎn)移。
材料與方法:
通過(guò)免疫磁珠分選技術(shù),將KATO-III細(xì)胞分為CD133+組和CD133—組,利用Transwell小室法檢測(cè)侵襲能力,Western blot和RT-PCR方法檢測(cè)EMT相關(guān)因子的表達(dá)差異以及siRNA誘導(dǎo)CD133基因沉默后EMT相關(guān)因子表達(dá)的改變
2、;Western blot方法檢測(cè)50例胃癌組織CD133和EMT相關(guān)因子的表達(dá),并研究?jī)烧呦嚓P(guān)性及與胃癌臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。
結(jié)果:
CD133+ KATO-III細(xì)胞組穿膜細(xì)胞數(shù)(67.66±10.47)顯著高于CD133—組(13.33±6.76,P=0.001),CD133+組中Snail、N-cadherin mRNA表達(dá)相對(duì)灰度值為0.311±0.015、0.581±0.020顯著高于CD133—組
3、(0.223±0.016,P=0.04;0.270±0.018,P=0.004);CD133+組中Snail、N-cadherin蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值為0.513±0.015、0.538±0.028,顯著高于CD133—組(0.179±0.023,P=0.03;0.202±0.032,P=0.02);CD133+組中E-cadherin mRNA及蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值分別為0.231±0.009、0.426±0.030,顯著低于CD133—
4、組(0.460±0.015,P=0.04;0.748±0.027,P=0.04)。siRNA干擾CD133基因表達(dá)后,KATO-III細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)顯著降低(P<0.05),Snail、N-cadherin mRNA表達(dá)相對(duì)灰度值為0.410±0.009和0.136±0.009,顯著低于空白對(duì)照組(0.621±0.010,P=0.04;0.685±0.018,P=0.01)。Snail、N-cadherin蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值為0.157
5、±0.013和0.217±0.023,顯著低于空白對(duì)照組(0.513±0.015,P=0.02;0.538±0.028,P=0.03);而與空白對(duì)照組相比(0.279±0.009,0.648±0.027),E-cadherin mRNA及蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值明顯增高(0.658±0.001,P=0.01;0.426±0.030,P=0.03)。胃癌組織中Snail及N-cadherin蛋白的表達(dá)與CD133表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05),E
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