共振光散射技術在蛋白質分析檢測中的應用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、共振光散射技術是上個世紀90年代興起的一門新型的檢測技術,因操作簡單、靈敏度高、快速、光譜具有特征性而備受廣大分析工作者的關注。目前該技術已應用于材料科學、天文學、生命科學、環(huán)境科學以及分析化學等多個領域的分析檢測工作。
  蛋白質是生命的基礎,血清蛋白在生物體內起著運輸、免疫、維持體內滲透壓、緩沖和營養(yǎng)等作用。因此、準確的對血清蛋白的含量檢測,對疾病的診斷在生物醫(yī)學上有著重要的意義。研究小分子與血清蛋白的作用機理,對揭示血清蛋白

2、的運輸機理,對藥物的運輸和藥效研究有著一定的指導意義。
  本論文的工作主要包括兩大方面:第一:建立了三種檢測血清白蛋白(BSA)的新方法;第二:考察了兩種小分子與牛血清白蛋白的作用機理。本論文的研究內容如下:
  (1)建立了孔雀石綠與Zn(Ⅱ)、剛果紅與Cu(Ⅱ)和櫻桃紅體系三種檢測BSA的新方法,其共振光散射增強信號分別位于372 nm、532 nm與340nm處。線性方程分別為:IRLS=20.3+0.82ρ(μg/

3、mL)、IRLS=145.8+210.3ρ(μg/mL)、IRLS=1187.9+32.16ρ(μg/mL),線性范圍為0.1~25μg/mL、0~2.0μg/mL、1.0~60.0μg/mL,檢出限分別為0.06μg/mL、0.005μg/mL、0.15μg/mL。據(jù)此建立了牛血清白蛋白的RLS檢測新方法,三種新的檢測方法對合成樣進行加標回收實驗,RSD值均小于3.0%,結果令人滿意。
  (2)利用熒光光譜法、同步熒光光譜法和

4、紫外光譜法分別研究了藥物分子頭孢曲松鈉(CS)、四碘熒光素鈉(FSS)和BSA之間的相互作用。結果表明CS對BSA的熒光淬滅為靜態(tài)淬滅,由熱力學參數(shù)的變化表明他們之間的作用力主要是靜電作用力,可能還存在疏水作用力。同步熒光光譜表明,CS與BSA的結合位點應該在BSA的色氨酸附近,并且CS的結合使BSA的構象發(fā)生了變化。根據(jù)偶極-偶極非輻射能量轉移理論計算得出CS與BSA之間的結合距離為4.61 nm,CS使BSA熒光淬滅屬于非輻射能量轉

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