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文檔簡介
1、目的:
?、偬接慉d-hIL-24基因體外對人肺腺癌耐順鉑A549/DDP細胞株的抑制作用;
?、谔接慉d-hIL-24基因體外誘導人肺腺癌耐順鉑A549/DDP細胞凋亡變化;
?、厶接慉d-hIL-24基因逆轉(zhuǎn)人肺腺癌耐順鉑A549/DDP細胞耐藥性后PI3K/AKT信號通路變化情況。
方法:
?、儆肁d-hIL-24、DDP及Ad-hIL-24+DDP作用于A549/DDP細胞抑制細胞生長;
2、
②應用CCK-8法檢測A549/DDP細胞增殖情況,計算抑制率;
③應用流式細胞儀檢測A549/DDP細胞凋亡的變化;
?、軕玫鞍踪|(zhì)印跡法檢測Akt,P-Akt,P-gp蛋白表達含量變化。
結(jié)果:
?、僭谶m宜培養(yǎng)條件下,QBI-293A細胞在第2天進入對數(shù)生長期,A549/DDP細胞在第3天進入對數(shù)生長期;
?、贏d-hIL-24能抑制A549/DDP細胞生長,作用細胞48h后其
3、抑制率為27.0%,DDP組抑制率為19.37%,聯(lián)合組抑制率為42.93%,聯(lián)合組使細胞抑制率從DDP組的19.37%上升到42.93%,從而使得A549/DDP細胞生長抑制逆轉(zhuǎn)2.22倍,差異有統(tǒng)計學意義;
?、哿魇郊毎麅x檢測Ad-hIL-24、DDP及Ad-hIL-24+DDP各組作用A549/DDP細胞48h后凋亡率分別為27.90%、16.40%、39.61%與陰性對照組比較有差異,其中聯(lián)合組較單獨組引起細胞凋亡更多,
4、逆轉(zhuǎn)作用更明顯;
?、苡玫鞍踪|(zhì)印跡法測各組蛋白含量變化,Ad-hIL-24+DDP組與其他各組相比P-Akt和P-gp蛋白表達含量下降,各組中Akt蛋白表達含量不變。
結(jié)論:
?、貯d-hIL-24能抑制A549/DDP細胞的體外生長,聯(lián)合DDP后細胞抑制率高于單獨組使得細胞生長抑制逆轉(zhuǎn)2.22倍,其可通過誘導A549/DDP細胞凋亡來發(fā)揮作用。
?、贏d-hIL-24逆轉(zhuǎn)A549/DDP耐藥,通過抑制
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