高遷移率族蛋白B1介導胰腺癌化療耐藥的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究高遷移率族蛋白B1(HMGB1)基因不同表達水平對胰腺癌細胞化療耐藥性的影響
  方法:(1)常規(guī)培養(yǎng)4株胰腺癌細胞系,設計不同的吉西他濱作用濃度及作用時間處理4株胰腺癌細胞,分別運用RT-PCR、Western Blot方法依次檢測藥物作用前后HMGB1在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平的表達狀況,并分析HMGB1的表達水平與吉西他濱作用情況的關聯(lián)性。(2)構建針對HMGB1的siRNA真核表達載體pSIREN-HMGB1/siRNA以

2、及HMGB1亞克隆的真核表達載體pBABE-HMGB1,用逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染胰腺癌細胞,篩選穩(wěn)定表達株,并以相應空轉(zhuǎn)細胞株作為對照組,運用RT-PCR、Western Blot、MTT方法檢測相關mRNA、蛋白表達水平及吉西他濱的IC50。
  結(jié)果:HMGB1在4株胰腺癌細胞中均有不同程度的表達,其表達水平隨吉西他濱作用濃度的增加或作用時間的延長而逐漸升高;沉默HMGB1的表達后胰腺癌細胞的存活率降低;上調(diào)HMGB1表達后吉西他濱對

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