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文檔簡介
1、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)能引起水稻上的一種重要病害-稻瘟病,了解其致病過程和機理對于防治稻瘟病菌有重要作用。近年研究表明細胞自噬可能參與了稻瘟病菌侵染水稻過程中分生孢子體死亡的過程。細胞自噬是細胞中一種物質(zhì)降解方式,在一些特定情況下,自噬被誘導,一些長壽蛋白質(zhì)和細胞器被運送到液泡/溶酶體中被降解,從而能量和物質(zhì)得以重新利用。此過程在許多生物體中是保守的,一些參與過程的基因也是保守的。稻瘟病菌中存在與啤酒酵母自噬相
2、關基因,ScATG1和,ScATG8同源的兩個基因MgATG1和MgATG8,它們的缺失突變子表型與野生型存在很大差異。本文則分離和克隆了,ScATG9在稻瘟病菌中的同源基因MgATG9,通過基因敲除的方法初步分析了MgATG9在致病及相關過程中的作用。研究結果如下: 1.利用ScATG9基因預測的氨基酸序列在稻瘟病菌基因組數(shù)據(jù)庫中檢索序列相似的基因,定名為MgATG9。 2.PCR擴增獲得cDNA克隆。測序分析CDS長
3、2754nt,編碼918aa。 3.構建MgATG9基因置換載體,得到基因MgATG9缺失突變體△mgatg9。 4.基因MgATG9缺失后,細胞自噬過程中斷,在液泡中未見自噬泡的積累。 5.突變子在CM培養(yǎng)基上生長時菌絲稀疏,產(chǎn)孢量顯著下降。 6.突變子分生孢子發(fā)育受到影響。 7.突變子附著胞膨壓顯著下降。 8.突變子致病性幾乎完全喪失,在水稻和大麥葉片上不能形成可見病斑;在有傷口的大麥
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