1、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)是研究絲狀真菌的重要模式生物，也是引起水稻重要病害稻瘟病的病原菌。該菌侵染循環(huán)過程經(jīng)歷了分生孢子萌發(fā)、附著胞分化、侵入栓的形成以及侵染生長，這一過程涉及復雜的細胞分化、信號轉(zhuǎn)導和極性生長。G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)作為一類細胞表面受體，在接受不同的外源信號中起重要作用，介導著對多種刺激物的應答。刺激信號包括：生物素、氣味分子、光、神經(jīng)遞質(zhì)、內(nèi)分泌和旁分泌的激素、營養(yǎng)因子等等。 D

2、eZwaan等克隆了一個新的跨膜蛋白編碼基因Pth11，與表面識別有關，Mpg1可能通過Pth11將其識別的疏水性信號傳遞給G蛋白，從而激活細胞內(nèi)的cAMP和MAP蛋白激酶等信號途徑。Kulkar(2005)用生物信息學的方法分析表明稻瘟病菌全基因組序列中有14個可能的GPCRs。特別是發(fā)現(xiàn)了61個與PTH11同源的GPCRs類似蛋白，這些蛋白在結(jié)構(gòu)上含典型的多個跨膜區(qū)和N端胞外GPCRs結(jié)構(gòu)域(即胞外富半胱氨酸的EGF類結(jié)構(gòu))。

3、 因此我們推測GPCRs和GPCRs類似蛋白可能在稻瘟病菌不同侵染時期可能參與識別不同的植物信號，在致病性調(diào)控過程及真菌與植物互作中起重要的作用。 本研究選取其中的2個可能的GPCR基因MGG_02855.5和MGG_04698.5作為候選基因，通過基因敲除的方法構(gòu)建基因失活突變體。研究這些突變體在生長、交配、產(chǎn)孢、附著胞形成、侵入和植物侵染生長中的表型，以野生型GUY11作對照。對于表型有明顯差異的基因失活突變體進行互補，觀

4、察其表型是否恢復，從而確定該基因的功能。 研究發(fā)現(xiàn)，MGG_04698.5基因的失活突變體在產(chǎn)孢、菌絲生長速度、菌絲顏色與野生型GUY11相比并無明顯變化，但在疏水性表面孢子萌發(fā)、附著胞形成時間相對GUY11延遲；以相同濃度的孢子濃度接種水稻品種C039，突變體致病性比GUY11增強。 MGG_02855.5基因的失活突變體產(chǎn)孢量明顯比野生型GUY11減少，菌絲顏色變的更黑，氣生菌絲也相對減少，而在生長速度、交配、孢子萌