1、目的：
　　1.在全國范圍內(nèi)收集遺傳性視神經(jīng)病變樣本，進(jìn)行Leber遺傳性視神經(jīng)病變(Leber's hereditary optic neuropathy, LHON)相關(guān)的線粒體DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)原發(fā)突變位點(diǎn)(m.3460G＞A，m.11778G＞A，m.14484T＞C)的篩選。
　　2.對121例攜帶3個(gè)原發(fā)突變位點(diǎn)之一的LHON家系進(jìn)行全面系統(tǒng)的臨床評估和眼科學(xué)檢查，確定每個(gè)家

2、系的外顯率和表現(xiàn)度，評估家系成員的臨床表型（包括視力損傷程度、發(fā)病年齡、男女發(fā)病比例）。
　　3.對LHON重點(diǎn)家系和正常對照進(jìn)行線粒體全基因測序分析，篩查與LHON相關(guān)的候選mtDNA新突變，并繪制中國LHON人群mtDNA突變頻譜。
　　4.探討3例攜帶m.3571C＞T突變的LHON家系的臨床、遺傳和分子生物學(xué)特性，分析該突變以及線粒體單體型、核修飾因子、環(huán)境因素等對中國LHON家系外顯率和表現(xiàn)度的影響。
　　方

3、法：
　　1.通過與北京、河北、福建等全國各地多家醫(yī)院的合作，建立起LHON家系的全國收集網(wǎng)絡(luò)，可全面采集LHON家系和臨床資料。
　　2.對LHON家系成員進(jìn)行詳細(xì)的臨床檢查，包括病史采集，視力，色覺，視野，眼底，視覺誘發(fā)電位(VEP)等。
　　3.使用酚-氯仿法提取患者和正常對照的全基因組DNA，PCR擴(kuò)增線粒體DNA三個(gè)原發(fā)位點(diǎn)所在區(qū)域，純化并測序。
　　4.使用24對有局部重疊的引物對先證者和正常對照的m

4、tDNA全序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增、純化及測序。
　　5.使用相關(guān)生物軟件（DNAStar、Chromas、ClustalX等）分析測序結(jié)果，篩查新變異位點(diǎn)和有功能意義的多態(tài)性位點(diǎn)，然后通過臨床評估、突變造成的結(jié)構(gòu)功能改變的相關(guān)分析、種系發(fā)生學(xué)分析、線粒體單體型分析等方法，評估其對LHON可能的影響。
　　結(jié)果：
　　1.從2011年9月到2013年12月，本實(shí)驗(yàn)室已在全國范圍內(nèi)收集了363例視神經(jīng)病變的樣本。3個(gè)原發(fā)突變位

5、點(diǎn)的篩查結(jié)果顯示，121例家系攜帶三個(gè)原發(fā)突變位點(diǎn)，其中108例攜帶m.G11778G＞A，9例攜帶m.14484T＞C，4例攜帶m.3460G＞A。
　　2.對121例攜帶原發(fā)突變位點(diǎn)的家系進(jìn)行臨床評估，發(fā)現(xiàn)這些家系中患者的平均發(fā)病年齡為21.3歲，視力損傷程度從輕度、中度、重度到極重度不等，男女發(fā)病比例為8.3∶1。
　　3.對未攜帶三個(gè)原發(fā)突變位點(diǎn)的LHON家系行線粒體全基因組測序分析，發(fā)現(xiàn)3例攜帶m.3571C＞T突

6、變的LHON家系。
　　4.3例攜帶m.3571C＞T突變的LHON家系患者都表現(xiàn)出典型的LHON臨床特征，3例家系先證者的發(fā)病年齡分別為8歲、21歲、22歲，視力損傷程度從輕度、重度到極重度不等，外顯率分別為41.7％、35.3％、20％。
　　5.m.3571C＞T位點(diǎn)位于高度保守區(qū)（保守系數(shù)為94.1％），線粒體單體型分析表明，這3例家系先證者的mtDNA序列分別屬于東亞單體型B4c1b2，B4c，B4c。
　　

7、6.359例正常對照中發(fā)現(xiàn)3例攜帶m.3571C＞T突變。
　　結(jié)論：
　　1.在中國LHON人群中，攜帶m.G11778G＞A突變比例最多，m.14484T＞C其次，m.3460G＞A最少。
　　2.LHOH男性患者的比例明顯高于女性，平均發(fā)病年齡為21.3歲，m.G11778G＞A患者的視力損傷程度最為嚴(yán)重。
　　3.3例LHON家系成員都攜帶m.3571C＞T突變位點(diǎn)，并且表現(xiàn)出LHON患者典型臨床特征和較