1、目的：子宮頸癌是婦女生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，約占所有婦科腫瘤的10％～13％，死亡率居?jì)D女惡性腫瘤的第二位。根據(jù)世界范圍內(nèi)的統(tǒng)計(jì)，每年新發(fā)病例80％來(lái)自發(fā)展中國(guó)家。在我國(guó)，每年子宮頸癌的新發(fā)病例數(shù)超過(guò)13萬(wàn)，每年死于子宮頸癌的婦女約有2萬(wàn)人。子宮頸癌的發(fā)病是涉及多種因素、多個(gè)步驟的病理過(guò)程，對(duì)化學(xué)治療（化療）耐藥是導(dǎo)致子宮頸癌患者治療失敗的主要原因之一。研究子宮頸癌相關(guān)基因，從分子水平上了解細(xì)胞癌變機(jī)制，為子宮頸癌的早期診斷、鑒別

2、診斷及預(yù)測(cè)預(yù)后提供分子指標(biāo)，具有十分重要的意義。
　　 人類(lèi)銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(hCTR1)被認(rèn)為是人體內(nèi)具有高親和力的銅攝入蛋白。國(guó)外學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，銅與腫瘤細(xì)胞密切相關(guān)，很多類(lèi)型的腫瘤患者的血清中含有異常高水平的銅。hCTR1也調(diào)節(jié)細(xì)胞中順鉑的含量。hCTR1在子宮頸鱗癌的表達(dá)情況將成為子宮頸癌患者治療的新的有效生物靶點(diǎn)。
　　 脆性組氨酸三聯(lián)體(FHIT)基因是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的與子宮頸癌密切相關(guān)的抑癌基因，F(xiàn)HIT基因失活與多種

3、惡性腫瘤有關(guān)，特別是那些直接與外界接觸的上皮性腫瘤的發(fā)展有關(guān)。該基因跨越人類(lèi)染色體脆性部位FRA3B和家族性腎細(xì)胞癌相關(guān)染色體交叉易位t(3；8)(p14.2；424)斷裂點(diǎn)，是第一個(gè)將染色體脆性易位點(diǎn)與腫瘤相聯(lián)系的分子生物學(xué)證據(jù)。FHIT表達(dá)下降或缺失可能在子宮頸鱗癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用，其表達(dá)水平可成為評(píng)價(jià)腫瘤惡性程度的潛在指標(biāo)。
　　 增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)是一種核內(nèi)蛋白質(zhì)，是DNA聚合酶δ的輔助蛋白，參與調(diào)節(jié)

4、DNA的合成，與細(xì)胞的增殖周期密切相關(guān)，其含量反映了細(xì)胞的增殖程度，又稱(chēng)為周期抗原。PCNA為增殖期細(xì)胞特異性表達(dá)的核蛋白，是目前腫瘤增殖活動(dòng)研究中可靠的增殖期標(biāo)志物。PCNA可成為反映CIN和子宮頸癌細(xì)胞異常增殖的靈敏標(biāo)志。
　　 本課題采用組織芯片技術(shù)及免疫組化方法檢測(cè)hCTR1、FHIT和PCNA三種相關(guān)基因在子宮頸不同程度病變中的表達(dá)情況，分析hCTR1、 FHIT和PCNA的異常表達(dá)在子宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中的相互關(guān)系，

5、探討hCTR1、FHIT和PCNA與子宮頸癌臨床指標(biāo)之間的相互關(guān)系。這對(duì)于了解子宮頸腫瘤的發(fā)病機(jī)制，指導(dǎo)子宮頸癌患者術(shù)后治療有重要意義。
　　 方法：
　　 1.收集河北省人民醫(yī)院病理科2009年6月～2010年5月宮頸組織共177例，其中子宮頸鱗癌40例，CIN組織106例(CINⅠ，34例：CINⅡ，31例；CINⅢ，41例)，正常宮頸組織31例。
　　 2.應(yīng)用組織芯片技術(shù)及免疫組織化學(xué)方法(SP法)檢測(cè)子

6、宮頸鱗癌、CIN組織及正常宮頸鱗狀上皮組織中hCTR1、FHIT和PCNA蛋白的表達(dá)。
　　 3.采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：
　　 1.組織芯片結(jié)果按課題設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)方法要求共制作8x8陣列組織芯片3張，有8個(gè)位點(diǎn)缺失，12個(gè)位點(diǎn)組織無(wú)意義，其他位點(diǎn)均可見(jiàn)足夠的組織結(jié)構(gòu)。最終樣本共157例，其中子宮頸鱗癌組40例，CIN組94例(CINⅠ，27例；CINⅡ，

7、29例；CINⅢ，38例)，正常宮頸組織23例，組織位點(diǎn)的形態(tài)可觀測(cè)率在88.7％。HE染色均勻，無(wú)脫片、異位和皺折，顯示組織著色良好。免疫組織化學(xué)染色，陽(yáng)性定位清楚，背景干凈，無(wú)掉片現(xiàn)象。
　　 2.hCTR1在子宮頸上皮不同病變中的表達(dá)在CIN和子宮頸鱗癌病例中，無(wú)論是基底層還是其他病變各層均可見(jiàn)細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜陽(yáng)性表達(dá)，子宮頸鱗癌(87.50％)及CINⅢ(81.58％)、CINⅡ(65.52％)均明顯高于正常宮頸鱗狀上皮(

8、17.39％)、CINI(29.63％)中hCTR1的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；hCTR1表達(dá)在子宮頸鱗癌中明顯高于CINⅡ(P＜0.05)；其他組之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3.FHIT在宮頸上皮不同病變中的表達(dá)在正常宮頸鱗狀上皮中，F(xiàn)HIT表達(dá)陽(yáng)性率100％，從正常宮頸鱗狀上皮(100％)、CINⅠ(74.07％)、CINⅡ(58.62％)、CINⅢ(34.21％)到子宮頸鱗癌(32.

9、50％)，F(xiàn)HIT表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞逐漸減少。FHIT在各組間陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；FHIT陽(yáng)性率在子宮頸鱗癌及CIN各組明顯低于正常宮頸鱗狀上皮中的表達(dá)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；CINⅢ、子宮頸鱗癌與CINⅠ、CINⅡ之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4.PCNA在子宮頸上皮不同病變中的表達(dá)在CINⅡ(55.17％)-CINⅢ(71.05％)、子宮頸鱗癌(75.00％)中PCNA陽(yáng)性表

10、達(dá)，明顯高于正常宮頸組織(26.09％)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；子宮頸鱗癌、CINⅢ與CINⅠ之間PCNA陽(yáng)性率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；子宮頸鱗癌與CINⅡ之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；其他組之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 5.子宮頸鱗癌中hCTR1、FHIT和PCNA之間的相關(guān)性分析在子宮頸鱗癌中FHIT和PCNA表達(dá)具有顯著負(fù)相關(guān)性(P＜0.05，r=-0.377)；h

11、CTR1與PCNA、FHIT的表達(dá)之間均無(wú)相關(guān)性(P＞0.05)，rhCTR1與PCNA=0.026, rhCTR1與FHIT=-0.296。
　　 6.子宮頸鱗癌中hCTR1、FHIT和PCNA表達(dá)與年齡、腫瘤大小、分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及病理分級(jí)之間的關(guān)系子宮頸鱗癌FHIT低表達(dá)或缺失在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性率(11.76％)明顯低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(47.83％)(P＜0.05)；FHIT表達(dá)與臨床分期、腫瘤大小、病

12、理分級(jí)及患者年齡均無(wú)顯著性差異；PCNA蛋白的表達(dá)與子宮頸鱗癌臨床分期及組織學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽(yáng)性表達(dá)率為94.12％，未轉(zhuǎn)移組中為60.67％，兩者之間有顯著性差異(P＜0.05)；hCTR1表達(dá)與患者年齡、臨床分期、腫瘤大小、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.免疫組化方法檢測(cè)hCTR1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率從正常宮頸鱗狀上皮、CIN到子宮頸鱗癌逐漸增高，可輔助

13、宮頸病變?cè)\斷，采取更積極主動(dòng)的有效措施，提高宮頸癌的治愈率和生存率。
　　 2.檢查宮頸CIN中的FHIT和PCNA蛋白表達(dá)情況，可用作高級(jí)別的CIN篩查或預(yù)測(cè)；在子宮頸鱗癌中FHIT和PCNA表達(dá)具有負(fù)相關(guān)性，F(xiàn)HIT和PCNA對(duì)于子宮頸癌前病變和子宮頸癌的篩查和早期診斷具有一定的臨床參考價(jià)值。
　　 3.免疫組化方法檢測(cè)FHIT蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率從正常宮頸鱗狀上皮、CIN到子宮頸鱗癌逐漸降低；檢測(cè)PCNA蛋白陽(yáng)性表達(dá)率