1、背景：許多天然產(chǎn)物都是來(lái)源于已知微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物。許多低分子量的代謝產(chǎn)物具有顯著生理活性。如青霉素、頭孢菌素、麥角新堿還有他汀類等都是真菌類次級(jí)代謝產(chǎn)物。三峽庫(kù)區(qū)(Three Gorges Reservoir)位于由青藏高原向長(zhǎng)江中下游平原傾斜的過渡帶，是我國(guó)生態(tài)環(huán)境保護(hù)的重點(diǎn)地區(qū)。對(duì)三峽庫(kù)區(qū)的土壤真菌研究現(xiàn)在還很少，只有關(guān)于三峽庫(kù)區(qū)大型真菌的研究。因此對(duì)三峽庫(kù)區(qū)這一獨(dú)特的地理位置的土壤真菌研究可以豐富其菌種資源，為以后的開發(fā)與利用

2、提供一些參考資料。本文對(duì)從三峽庫(kù)區(qū)采集的土壤樣品中分得一株抑菌活性強(qiáng)的土壤真菌進(jìn)行研究。煙曲霉是一種重要的致病真菌，其某些成分或毒素可直接造成機(jī)體損害，其次生代謝產(chǎn)物也是生物活性產(chǎn)物或者新藥開發(fā)的重要來(lái)源。以往從其代謝產(chǎn)物中分離得到的多個(gè)化合物，有些毒性較大或藥理活性一般，或產(chǎn)物量甚微，很難開發(fā)成藥物而應(yīng)用于臨床。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)其中一些化合物具有新的藥理活性和骨架結(jié)構(gòu)因而重新引起人們的關(guān)注。
　　 目的：由于以往不同生源的煙曲霉(A

3、spergillus fumigatus)次級(jí)代謝產(chǎn)物研究所表現(xiàn)出來(lái)的化學(xué)和活性多樣性，有必要進(jìn)行更多的發(fā)酵條件和生物合成代謝調(diào)控研究，以期獲得更多的結(jié)構(gòu)新穎、活性特殊的次級(jí)代謝產(chǎn)物。因此對(duì)不同發(fā)酵培養(yǎng)基條件下煙曲霉的次級(jí)代謝產(chǎn)物活性研究就很有意義。
　　 方法：通過研究該菌在5種不同培養(yǎng)基中發(fā)酵情況，考察煙曲霉在不同培養(yǎng)基條件下次級(jí)代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生情況。選用的培養(yǎng)基為PD液體培養(yǎng)基，GC培養(yǎng)基，查氏培養(yǎng)基，查氏加1％玉米漿培養(yǎng)基

4、，查氏加1％黃豆餅粉培養(yǎng)基。在選定的發(fā)酵條件下進(jìn)行50L大規(guī)模發(fā)酵，得到相應(yīng)的一些活性物質(zhì)。用丙酮提取菌體，得到胞內(nèi)代謝產(chǎn)物。然后進(jìn)行減壓濃縮處理得到次級(jí)代謝產(chǎn)物浸膏，再采用柱層析、Sephadex LH-20和制備HPLC等方法進(jìn)行分離純化，得到相應(yīng)的單體化合物，并用NMR、MS方法分析化合物結(jié)構(gòu)。所得到的化合物進(jìn)行生物活性實(shí)驗(yàn)，包括抗菌與MTT法抗腫瘤實(shí)驗(yàn)。
　　 結(jié)果：利用真菌基因組的ITS保守序列進(jìn)行菌種鑒定，PCR擴(kuò)增

5、測(cè)序后在NCBI中進(jìn)行比對(duì)，鑒定為煙曲霉，命名為IMB-SX28。該菌在查氏加％1玉米漿作為培養(yǎng)基條件下，胞內(nèi)次級(jí)代謝產(chǎn)物的抗菌活性最強(qiáng)，且HPLC色譜峰面積最大。通過50L大規(guī)模發(fā)酵罐處理得到150g的菌體丙酮提取浸膏部分。經(jīng)過柱層析等分離方法得到一組(共15種)不同的分離組分。其中分離了3個(gè)不同的化合物單體，分別是SX-11為鄰苯二甲酸二丁酯、SX-26為硬脂酸、SX-60為氮雜環(huán)化合物。其中SX-60具有較強(qiáng)抗金葡菌活性其抑菌圈直