抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的研制及其ELISA檢測(cè)方法的初步建立.pdf_第1頁(yè)
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1、赭曲霉毒素A(OA)是曲霉菌屬和青霉菌屬的某些產(chǎn)毒菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物,對(duì)農(nóng)作物的污染在全球范圍內(nèi)都比較嚴(yán)重,是一種強(qiáng)烈的腎毒素和肝毒素,還具有免疫抑制性,并有致畸、致癌和致突變的作用。 目前OA的檢測(cè)技術(shù)主要有儀器法和免疫分析技術(shù)。儀器法主要有薄層色譜法,高效液相色譜法以及質(zhì)譜聯(lián)合法等,這些方法樣品處理繁瑣費(fèi)時(shí),成本高,而且需要有經(jīng)過(guò)專門訓(xùn)練的專業(yè)人員來(lái)操作復(fù)雜的儀器設(shè)備,不適合大批量樣品的測(cè)定。免疫分析技術(shù)主要是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)

2、定(ELISA),作為一種快速、靈敏、特異的檢測(cè)方法,正逐漸應(yīng)用于毒素的殘留檢測(cè)。本研究通過(guò)抗原的合成和抗赭曲霉毒素A單克隆抗體的研制,建立了OA的ELISA檢測(cè)方法。 利用試劑盒偶聯(lián)的OA-BSA為免疫原免疫6周齡BALB/c小鼠,采其脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞融合,用間接EIASA以及間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA篩選,經(jīng)五次亞克隆得到了穩(wěn)定分泌抗OA單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株D6。特異性試驗(yàn)證明D6株單抗有較強(qiáng)的特異性。 依照

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