胸膜肺炎放線桿菌ApxⅢA基因的克隆表達(dá)及毒力因子免疫原性的測定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、豬傳染性胸膜肺炎(Porcine contagiouspieuropneumonia,PCP)是由胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus pieuropneumoniae,APP)引起的以肺出血、壞死和纖維素性滲出為主要病變的高度接觸性傳染病.自1957年P(guān)attison首次報道本病以來,該病在世界范圍內(nèi)廣泛流行,并給各國養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失.由于APP極易產(chǎn)生耐藥性,疫苗接種是防控本病的主要措施.目前,國內(nèi)主要使用滅活疫

2、苗預(yù)防和控制本病.但由于APP血清型較多,滅活疫苗的保護(hù)效果十分有限.因此,開發(fā)新型疫苗已經(jīng)成為研究熱點. 本研究通過基因工程方法,重組表達(dá)APP的一種毒力因子,制備了重組亞單位疫苗,并進(jìn)行了免疫保護(hù)效果的探討.研究表明,APP分泌的外毒素(ApxI、ApxIII)和外膜蛋白(Omp)等不僅是APP重要的毒力因子,同時也是重要的免疫原性因子. 1 成功構(gòu)建了重組表達(dá)載體pET-ApxⅢA.并將3種重組表達(dá)載體pET-Ap

3、xⅢA、pET-ApxIA、pPRo-Omp(后二種為實驗室已經(jīng)構(gòu)建好)分別在大腸桿菌JM109(DE3)中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),獲得3種重組蛋白p:ET-ApxIA(rApxI)、pET-ApxⅢA(rApxⅢ)、pPRo-Omp(rOmp),大小分別約41、41和45Ku Western-blotting分析表明,3種重組蛋白具有良好的抗原性. 2 將rApxⅠ、rApxⅢ和rOmp組合作為疫苗I組,rApxⅠ、rApxⅢ、rOmp

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